玫瑰茄（Hibiscus sabdariffa L.）又名洛神花，是一种集食用、药用、花卉于一体的药食两用经济作物，在我国广东、广西、福建、云南、台湾、海南等地均有种植。玫瑰茄鲜花萼肉质多汁，色泽鲜艳，富含花青素、有机酸、维生素C 等营养成分，花萼的干品或鲜品具有较高经济价值，被广泛应用于食品、保健品、药品等领域[1-3]。玫瑰茄鲜花萼的含水量高达90%，其花萼肉质多汁的特性使其在贮运中极易失水萎蔫，继而出现霉变腐烂现象，从而失去商品价值。贮藏温度是影响果蔬货架期长短和品质好坏的首要因素[4]。因此研究不同贮藏温度对玫瑰茄鲜果生理特性及品质的影响，寻找出适宜的贮藏温度，对玫瑰茄产业发展至关重要。
适宜的贮藏温度有利于降低产品水分损失、抑制呼吸作用、降低褐变程度、维持抗氧化性、保持采后品质，从而延长果蔬的货架期，低温贮藏是目前应用较多的方法[5-6]。袁楚珊等[7]研究表明，0 ℃贮藏的黄桃采后腐烂率和褐变率均为0，显著低4 ℃和10 ℃。郝邢维等[8]研究表明0 ℃贮藏有助于李果实总酚及类黄酮含量的积累，延缓果实色泽、硬度、可滴定酸含量的下降，抑制呼吸强度及乙烯释放高峰的峰值，延缓李果实的成熟衰老进程。王春阳等[9]研究表明低温可延缓黄金勾豆角呼吸高峰的出现时间，减缓抗坏血酸含量、可溶性糖含量的下降，抑制多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）和过氧化物酶（peroxidase，POD）活性，减缓丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量的增加。冯雨等[10]研究表明适宜低温贮藏能增加血橙总酚、总黄酮、花色苷的含量并提高血橙的抗氧化活性，从而维持果实的良好品质。微冻保鲜技术是一种新型的保鲜方法，成为低温保鲜领域的研究热点[11]。王波[12]研究表明-3 ℃微冻贮藏在抑制龙眼的酶活性和减缓营养物质的损耗等方面均效果显著，可以更好地保持龙眼的品质。李孟洁等[13]研究表明-2 ℃贮藏下阿克苏苹果多酚氧化酶活性被抑制，糖心消失减缓，糖心果率较高，品质较好。张平等[14]研究表明-2 ℃贮藏的樱桃全部发生冷害，霉腐率均达到100%，而-0.5 ℃贮藏的冷害发生程度最小。有关贮藏温度对采后果蔬的生理和品质影响的研究较多，但尚未见关于贮藏温度对玫瑰茄采后生理及品质影响的研究。
本研究以桂玫瑰茄1 号鲜果为试验材料，测定不同贮藏温度（-3、4、8、25 ℃）下玫瑰茄生理特性及品质的变化，筛选出适宜的贮藏温度，以期为玫瑰茄鲜果采后保鲜提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
玫瑰茄鲜果：广西壮族自治区农业科学院科研展示基地，于开花后35 d 挑选大小一致、无机械损伤、无褐斑且无病虫害的新鲜玫瑰茄果实作为试验材料。
0.055 mm 聚乙烯保鲜袋：常州洛佶源实业有限公司；甲醇：无锡市晶科化工有限公司；正丁醇：广东光华科技股份有限公司；盐酸：成都市科隆化学品有限公司；硫酸铁铵：西安天茂化工有限公司；原花青素：北京百奥莱博科技有限公司；超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶试剂盒：苏州格锐思生物科技有限公司。所用试剂均为分析纯。
1.2 仪器与设备
YP1002B 电子天平：力辰科技仪器有限公司；UV-1750 分光光度计：日本岛津公司；DK-S28 恒温水浴锅：上海精宏实验设备有限公司；3-18KS 台式高速冷冻离心机：德国 Sigma 有限公司。
1.3 试验方法
1.3.1 样品处理
将玫瑰茄鲜果用聚乙烯保鲜袋密封包装，每袋50 个鲜果，分别置于-3（微冻）、4、8、25 ℃（常温）条件下贮藏，每个处理3 次重复。贮藏期间每4 d 测定失重率、腐烂率、原花青素含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（catalase，CAT）活性，测定周期为28 d。
1.3.2 失重率测定
采用重量法测定失重率，失重率（X，%）按下列公式进行计算[9]。
式中：W0 为初始质量，g；W1 为贮藏期间测量的质量，g。
1.3.3 腐烂率测定
腐烂率的测定参考高育文等[15]的方法，果实出现菌斑、发霉等均记为腐烂果实。腐烂率（Y，%）按下列公式进行计算。
式中：N 为腐烂果实数；T 为果实总数。
1.3.4 原花青素含量测定
采用正丁醇-盐酸比色法测定原花青素含量[1]，以玫瑰茄干重（dry weight，DW）计。
1.3.5 SOD、CAT、POD 活性测定
按试剂盒要求精准称取玫瑰茄花萼，加入相对应提取液（试剂盒提供），在冰浴条件下研磨成匀浆。于4 ℃、12 000 r/min 离心10 min，取上清液用于酶活测定。SOD、CAT、POD 活性采用试剂盒测定。具体操作参考试剂盒说明书。
1.4 统计分析
采用Excel 2010 进行基础数据整理，利用SPSS 23.0 软件对数据进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 贮藏温度对玫瑰茄鲜果腐烂率的影响
腐烂率是直观反映果实耐贮性的重要指标[15-16]。不同贮藏温度对玫瑰茄腐烂率的影响见表1。
表1 不同贮藏温度对玫瑰茄腐烂率的影响
Table 1 Effect of different storage temperatures on rotting rate of roselle
注：同行不同小写字母表示同一贮藏时间不同温度间差异显著（P＜0.05）。-表示无法统计。
贮藏时间/d 4 8 12 16 20 24 28腐烂率/%-3 ℃0.00b 0.00b 0.00b 0.00c 0.00b 0.00c 0.00b 4 ℃0.00b 0.00b 0.00b 0.00c 0.00b 2.58b 5.12a 8 ℃0.00b 0.00b 0.00b 2.58b 6.41a 100.00a-25 ℃3.85a 79.48a 100.00a 100.00a---
由表1 可知，玫瑰茄鲜果的腐烂率随贮藏时间延长和温度增加呈上升趋势，不同贮藏温度下腐烂率的增加程度存在差异，25 ℃贮藏下腐烂率增幅较大，其腐烂率显著高于其他温度（P＜0.05），25 ℃贮藏的玫瑰茄从贮藏第4 天开始出现腐烂，8 d 时腐烂率达79.48%，12 d 时腐烂率达100%，完全失去商品价值；8 ℃贮藏的玫瑰茄鲜果在贮藏16 d 时开始出现腐烂，但腐烂率低于25 ℃，贮藏24 d 时鲜果全部腐烂，腐烂率达100%；4 ℃贮藏条件下24 d 时开始出现腐烂，腐烂率仅2.58%，贮藏结束时腐烂率为5.12%；-3 ℃贮藏的玫瑰茄鲜果均未出现腐烂现象，腐烂率为0.00%，但置于室温解冻后鲜果花萼变软，不能维持原有状态，整体外观品质下降，不适宜的低温贮藏造成玫瑰茄鲜果发生冷害导致果实变软从而加速果实的劣变[17-18]。由此可知，4 ℃可有效地延缓玫瑰茄的腐烂速率，延长贮藏时间。
2.2 贮藏温度对玫瑰茄鲜果失重率的影响
失重率是影响果蔬含水量、感官、品质等的重要指标，失重率越大，其机体内含水量越少[19-21]。不同贮藏温度对玫瑰茄失重率的影响见图1。
图1 不同贮藏温度对玫瑰茄失重率的影响
Fig.1 Effect of different storage temperatures on weight loss rate of roselle
由图1 可知，在贮藏期间随贮藏时间的延长和温度的增加，玫瑰茄鲜果的失重率呈上升的趋势。在相同的贮藏时间，失重率依次为25 ℃＞8 ℃＞4 ℃＞-3 ℃，25 ℃贮藏的玫瑰茄失重率均显著高于其他贮藏温度，在贮藏12 d 时失重率最高，达4.75%。8 ℃贮藏的玫瑰茄失重率在贮藏4～12 d 时与4 ℃差异不显著（P＞0.05），在16～24 d 时显著高于4 ℃和-3 ℃，最高达3.37%；4 ℃贮藏的玫瑰茄在贮藏4～12 d 和24～28 d 时与-3 ℃的失重率差异不显著，但在贮藏16～20 d 时4 ℃的失重率显著高于-3 ℃，在贮藏28 d 时失重率达1.40%。-3 ℃贮藏的玫瑰茄在贮藏期间失重率均低于其他温度，在贮藏28 d 时失重率仅1.35%。失重率随温度的变化可能是低温贮藏抑制了水分的蒸腾速率同时降低了玫瑰茄的呼吸作用进而降低了失重率。由此可见，低温贮藏可以有效降低玫瑰茄的失重率。
2.3 贮藏温度对玫瑰茄原花青素含量的影响
原花青素含量是玫瑰茄品质的重要评价指标[1]，温度对原花青素的生物合成和代谢具有重要的调节作用[22-23]。不同贮藏温度对玫瑰茄原花青素含量的影响见图2。
图2 不同贮藏温度对玫瑰茄原花青素含量的影响
Fig.2 Effect of different storage temperatures on proanthocyanidins content of roselle
由图2 可知，随着贮藏时间延长，玫瑰茄原花青素含量呈现波动性变化，但总体呈下降的趋势。4 ℃贮藏的玫瑰茄原花青素含量仅在贮藏20 d 时略低于-3 ℃，其他贮藏时间均高于其他温度，且原花青素含量依次为4 ℃＞-3 ℃＞8 ℃＞25 ℃。25 ℃贮藏4 d 时玫瑰茄原花青素含量与贮藏前差异不显著，但在8 d 时显著低于贮藏前；8 ℃贮藏的玫瑰茄原花青素含量仅在贮藏4 d 时与贮藏前差异不显著，在贮藏8～20 d 时原花青素含量显著下降，在贮藏20 d 时原花青素含量仅306.6 mg/100 g DW，较贮藏前降幅达50.51%；4 ℃贮藏的玫瑰茄在贮藏4～16 d 时原花青素含量均高于贮藏前，而在20～28 d 时的含量显著下降，28 d 时原花青素含量仅494.5 mg/100 g DW，较贮藏前降幅达20.18%；-3 ℃贮藏下随贮藏时间的延长玫瑰茄原花青素含量呈波动变化，在贮藏8～12 d 和24～28 d 时原花青素含量显著低于贮藏前，28 d 时原花青素含量降幅达29.70%。综上，低温能够减缓原花青素含量的下降，4 ℃为玫瑰茄的最适贮藏温度。
2.4 贮藏温度对玫瑰茄生理特性的影响
2.4.1 贮藏温度对玫瑰茄POD 活性的影响
POD 活性是反映果蔬生长发育、成熟衰老等生命全过程变化程度的重要指标，果实衰老越严重，POD活性则越高[24]。不同贮藏温度对玫瑰茄POD 活性的影响见图3。
图3 不同贮藏温度对玫瑰茄POD 活性的影响
Fig.3 Effect of different storage temperatures on POD activity in roselle
由图3 可知，在25、8、4 ℃贮藏下，随着贮藏时间的延长，POD 活性呈先上升后下降的趋势，而-3 ℃贮藏下随贮藏时间的延长POD 活性呈下降的趋势。在相同贮藏时间下POD 活性随温度的升高呈上升的趋势。25、8、4 ℃贮藏下POD 活性均在贮藏4 d 时达到最大值，其中25 ℃贮藏下的POD 活性最高达72.74 U/g，显著高于贮藏前，8、4 ℃的POD 活性高于贮藏前但差异不显著。在整个贮藏期间8 ℃贮藏的POD 活性均高于4 ℃和-3 ℃，4 ℃的POD 活性也均高于-3 ℃。25 ℃贮藏下POD 活性均高于贮藏前，8 ℃和4 ℃在贮藏4～8 d 时POD 活性与贮藏前差异不显著，此后显著低于贮藏前；-3 ℃贮藏下，在整个贮藏期POD 活性均显著低于贮藏前，在贮藏12 d 时出现极速下降，POD 活性仅11.63 U/g。由此可见，低温贮藏能够抑制POD 的活性，延缓衰老。
2.4.2 贮藏温度对玫瑰茄SOD 活性的影响
SOD 是一种重要的抗氧化酶，与果实的软化和衰老相关，采后贮运期间，其活性越高，表示果实贮藏性能越好[18]。不同贮藏温度对玫瑰茄SOD 活性的影响见图4。
图4 不同贮藏温度对玫瑰茄SOD 活性的影响
Fig.4 Effect of different storage temperatures on SOD activity in roselle
由图4 可知，在25、8、4 ℃贮藏下随贮藏时间的延长玫瑰茄SOD 活性呈先上升后下降的趋势，而-3 ℃贮藏下随贮藏时间的延长SOD 活性呈下降的趋势。-3 ℃贮藏下SOD 活性均低于贮藏前，在4～12 d 时与贮藏前差异不显著，在16～28 d 时显著低于贮藏前。4 ℃贮藏下在整个贮藏期间玫瑰茄的SOD 活性均高于其他贮藏温度，一直维持在较高的水平；贮藏4～24 d 时SOD 活性均高于贮藏前，其中8～16 d 时显著高于贮藏前，在贮藏8 d 时SOD 活性最高，达1 166.16 U/g，比贮藏前上升了83.74%；在贮藏4 d 和20～24 d 时与贮藏前差异不显著，贮藏结束时SOD 活性为587.77 U/g，略低于贮藏前但差异不显著。8 ℃贮藏下，在贮藏4～8 d时SOD 活性高于贮藏前但差异不显著，贮藏12～20 d时显著低于贮藏前，在20 d 时SOD 活性最低，仅为369.27 U/g，较贮藏前下降了41.82%。25 ℃贮藏下，在贮藏4 d 时SOD 活性达到峰值但与贮藏前差异不显著，在8 d 时显著低于贮藏前。由此可知，4 ℃贮藏能够保持玫瑰茄在贮藏期间更高的SOD 活性。
2.4.3 贮藏温度对玫瑰茄CAT 活性的影响
CAT 在活性氧防御系统中扮演着重要的角色，较高的CAT 活性可以延缓果蔬的衰老，保持更好的贮藏品质[25-26]。不同贮藏温度对玫瑰茄CAT 活性的影响见图5。
图5 不同贮藏温度对玫瑰茄CAT 活性的影响
Fig.5 Effect of different storage temperatures on CAT activity in roselle
由图5 可知，在贮藏期间玫瑰茄CAT 活性随贮藏时间的延长呈先上升后下降趋势，各贮藏温度在整个贮藏期间的CAT 活性均高于贮藏前。-3 ℃贮藏下在8～20 d 时CAT 活性均显著高于贮藏前，在8 d 时CAT活性达峰值，较贮藏前上升了88.88%，在贮藏8～28 d时CAT 活性均高于其他贮藏温度。4 ℃贮藏下CAT活性在贮藏16 d 时达到峰值且显著高于贮藏前，其他时间均与贮藏前差异不显著。8 ℃和25 ℃贮藏下CAT活性分别在12 d 和4 d 达到峰值。由此可知，低温能够保持玫瑰茄在贮藏期间更高的CAT 活性。
3 结论
通过不同贮藏温度对玫瑰茄贮藏品质和生理特性的研究可知，4 种不同贮藏温度下玫瑰茄的失重率和腐烂率随贮藏时间的延长和温度升高呈上升趋势；低温能够减缓玫瑰茄花萼原花青素含量的下降，4 ℃贮藏的玫瑰茄原花青素含量仅在贮藏20 d 时略低于-3 ℃，其他贮藏时间4 ℃贮藏的玫瑰茄花萼原花青素含量最高，降幅最低；POD 活性随温度升高呈上升的趋势，低温贮藏能够抑制POD 活性；4 ℃贮藏下玫瑰茄的SOD 活性均高于其他贮藏温度，一直维持在较高的水平；低温能够保持玫瑰茄在贮藏期间更高的CAT 活性；-3 ℃贮藏会导致冷害的发生，使玫瑰茄失去商品价值。综上所述，玫瑰茄鲜果在4 ℃时贮藏保鲜效果更好，该贮藏温度可以有效延缓果实的软化和衰老，延长果实贮藏保鲜期。
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