广西六堡茶因原产自广西梧州市苍梧县六堡镇而得名，已有1 500 多年的种植历史[1]。六堡茶以“红、浓、陈、醇”四绝著称，其汤色红浓，香气陈厚，甘醇可口。六堡茶可按不同的发酵年份和香型进行区分，发酵年份以三年、五年、十年的茶叶居多，年份越久，价格越高[2]；香型以槟榔香和陈香为主[3]。目前，关于六堡茶抗氧化活性研究的报道较少。因此，开展对不同年份香型六堡茶抗氧化活性研究，有利于广西六堡茶产业的发展，对广西经济和特色产品发展有重要意义。
六堡茶的化学成分包含挥发油、茶多酚及其氧化产物、茶多糖、咖啡碱以及一些矿质元素等功能物质，其中茶多酚类含量及种类对六堡茶品质有较大影响[4-5]。茶多酚能够清除体内自由基，改善肠道氧化应激[6]，并通过清除活性酶阻止氧化反应，具有抗衰老功效[7]。同时还有降血压血脂、收缩毛孔、保湿等功效[8]，茶多酚类化合物安全、无毒[9]，在医药、食品加工等方面已被广泛应用[10]。
本研究通过对2 种香型、3 个发酵年份的六堡茶以及老茶婆的主要茶多酚组成含量及抗氧化活性进行比较研究，以期为不同年份香型的六堡茶茶多酚研究及帮助消费者了解不同六堡茶的品质提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
六堡茶（三、五、十年的槟榔香；三、五、十年的陈香；老茶婆）：中国茶叶股份有限公司；单宁酸（标准品）：上海阿拉丁生化科技股份有限公司；表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）、表没食子儿茶素（epigallocatechin，EG）、表儿茶素没食子酸酯（epicatechin gallate，ECG）、表儿茶素（epicatechin，EC）、没食子儿茶素没食子酸酯（gallocatechin gallate，GCG）、儿茶素没食子酸（gallocatechin，GC）、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical，DPPH）、抗坏血酸、95%乙醇、硫酸、甲醇、甲酸、乙酸乙酯（均为分析纯）：上海源叶生物有限公司；乙腈、甲醇（均为色谱纯）：广西南宁蓝天试剂有限公司。
1.2 仪器
高速万能粉碎机（FW100）：天津市泰斯特仪器有限公司；电子天平（FA2104B）：上海越平科学仪器制造有限公司；离心机（LDZ4-2）：江苏省金坛市医疗仪器厂；紫外分光光度计（UV-1780）：日本岛津仪器有限公司；红外光谱仪（Nicolet Is50）：美国热电仪器有限责任公司；高效液相色谱仪（Wates2695）：美国waters 公司；全波长酶标仪（Multiskan-Sky）：美国赛默飞世尔有限公司。
1.3 试验方法
1.3.1 六堡茶茶叶的预处理
将三、五、十年的槟榔香，三、五、十年的陈香以及老茶婆（原茶未发酵，存放十年）共7 种不同年份香型六堡茶打粉过2 号筛，保存待用。
1.3.2 单宁酸标准曲线的制作
参考文献[11]的方法测定六堡茶茶多酚总酚。精准称量单宁酸10.0 mg，纯水溶解并定容至25 mL，配制0.4 mg/mL 的标准溶液，用移液枪精密量取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL 至7 个棕色容量瓶中并标号，之后取0.5 mL 福林酚加入容量瓶；暗处反应5 min 后分别加入8%Na2CO3 溶液2 mL，加入纯水定容并混合均匀，于35 ℃水浴条件避光显色1 h，并在波长为765 nm 下测定其吸光度A，以浓度c 为横坐标，吸光度A 为纵坐标绘制标准曲线。得到线性回归方程为A=64.304c+0.001 5 相关系数R2=0.999 2，线性范围为0.001 552～0.009 312 mg/mL。标准曲线如图1 所示。
图1 单宁酸标准曲线
Fig.1 Standard curve of tannic acid
1.3.3 六堡茶总茶多酚含量测定
精密称取六堡茶粉末1.0 g，加入25 mL 浓度为65% 乙醇放于超声清洗器中超声30 min，温度设定为70 ℃。过滤得到六堡茶茶多酚总提取液，将其总提液过0.45 μm 微孔滤膜后吸取1 mL 放于25 mL 容量瓶中，后续按照步骤1.3.2 测定并计算总茶多酚含量。收集六堡茶茶多酚提取液，浓缩后于-4 ℃冷冻干燥，得茶多酚粉末备用。
1.3.4 六堡茶茶多酚的成分及含量测定
高效液相色谱条件如下。
流动相A：甲醇，流动相B：0.1% 甲酸水溶液，流速：1 mL/min，柱温：40 ℃，检测波长：278 nm，进样量：5 μL，流动相梯度洗脱条件0～4 min（82%A+18%B），4～15 min（A：82% 70%+B：18% 30%），15～20 min（A：70%50%+B：30% 50%），20～25 min（A：50%+B：50%），25～28 min（A：20%+B：80%）[12]。
使用无水甲醇溶液配制成1 mg/mL 表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG），表儿茶素（EC）、没食子儿茶素没食子酸酯（GCG）、儿茶素没食子酸（GC）标准品溶液，置于5 mL 棕色容量瓶中。配制成浓度为1.00、0.14、0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02 mg/mL 6 种标准品溶液。按照色谱条件每种浓度进样5 μL，测其峰面积，最后绘制标准曲线。
分别取步骤1.3.3 中的六堡茶茶多酚10 mg，加入10 mL 浓度为70% 甲醇，摇匀，过0.45 μm 微孔滤膜，后续按照上述液相色谱条件测定，最后根据液相色谱标准曲线计算不同发酵年份香型六堡茶茶多酚含量。
1.3.5 不同年份香型六堡茶的红外光谱分析
参考文献[13]的方法测定红外光谱。称取六堡茶茶多酚粉末1～2 mg，另称光谱纯KBr 粉末20 mg，于玛瑙乳钵中研磨均匀，放入远红外干燥灯中干燥5 min，取出后装入粉末压片模具，慢慢转动模具，直至压片机压紧。旋开磨具，用镊子取下压片，装入样品架，置于样品窗口，开机进行红外扫描，扫描波数为4 000～450 cm-1。
1.3.6 六堡茶的抗氧化活性测试
1.3.6.1 抑制DPPH 自由基活性
DPPH 溶液的配制：精密称取DPPH 粉末7.9 mg，置于棕色容量瓶中，用乙醇溶解，定容至100 mL，配制成浓度为200 μmol/L 的DPPH 乙醇溶液。取步骤1.3.2 的茶多酚样品50 mg 于棕色容量瓶中，配制成浓度为10 mg/mL 的溶液。过0.45 μm 微孔滤膜后稀释成浓度6.25、3.125、1.563、0.78、0.39、0.195 mg/mL 的溶液用于抗氧化测试。选择VC 作为阳性对照。取96 孔板，依次在板中各孔精密加入0.2 mL DPPH 溶液和0.1 mL 待测样品，混合均匀，避光反应30 min，然后在517 nm 处，用酶标仪测定吸光度[14]，每孔作3 个平行，取平均值。DPPH 自由基清除率（Y，%）计算公式如下。
式中：A1 为样品溶液100 μL+DPPH 溶液100 μL的吸光度；对照组A2 为超纯水100 μL+DPPH·溶液100 μL 的吸光度；空白组A3 为无水乙醇100 μL+样品溶液100 μL 的吸光度。
EC50 的计算为样品浓度的负对数为横坐标（-lg），以清除率为纵坐标，获得直线方程，其相关系数r 至少为0.9 以上较为合适，根据直线方程计算抑制率为50%时，样品的浓度即为EC50。
1.3.6.2 还原能力测定
1% 铁氰化钾溶液配制：精密称取1.0 g 铁氰化钾溶于蒸馏水中，定容至100 mL 容量瓶。磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution，PBS）溶液配制：10% 三氯乙酸：精密称取10 mL 三氯乙酸溶于蒸馏水中，定容至100 mL 容量瓶。0.1% 三氯化铁：精密称取0.1 g 三氯化铁溶于蒸馏水中，定容至100 mL 容量瓶。
样品溶液：精密称取样品200 mg，加蒸馏水溶解，定容于25 mL 容量瓶中，配成浓度为（10、8、6、4、2、1 mg/mL）的溶液，选择坏血酸作为阳性对照。
采用全波长酶标仪进行还原力测试，精密吸取不同浓度样品或对照品溶液（10、8、6、4、2、1 mg/mL）2 mL与1% 铁氰化钾溶液2.00 mL 与2 mL PBS 溶液混合，50 ℃反应20 min，加入2 mL 三氯乙酸和0.5 mL 三氯化铁，于700 nm 处测吸光度（A1），以蒸馏水代替样品做空白测其吸光度（A2）。每个样品平行做3 份取平均值[14]。按公式计算还原能力（H，%）。
1.4 数据处理
采用Origin 9 pro 进行绘图，SPSS 26.0 进行数据分析，试验数据为3 次重复试验的平均值，P＜0.05 表示存在显著性差异。
2 结果与分析
2.1 不同年份香型的六堡茶总茶多酚含量
不同发酵年份香型六堡茶总茶多酚含量见表1。
表1 不同发酵年份香型六堡茶总茶多酚含量
Table 1 Tea polyphenol components of Liubao tea with different fermentation years and aromatic
种类老茶婆三年槟榔香五年槟榔香十年槟榔香三年陈香五年陈香十年陈香吸光度0.538 2 0.911 6 0.712 3 0.740 3 0.695 8 0.734 8 0.740 3含量/（mg/mL）83.497 141.666 114.980 110.619 114.123 108.000 91.816
由表1 可知，三年槟榔香的六堡茶总茶多酚含量最高，为141.666 mg/mL。同时槟榔香工艺的六堡茶总茶多酚含量要大于陈香工艺的六堡茶。经过工艺加工后的六堡茶中，随着年份的增长，六堡茶内的茶多酚含量会逐渐降低，这是因为由于六堡茶在存放过程中受到外界环境的影响，特别是温湿度的影响，茶多酚发生水解、氧化、降解等作用[15]，使得茶多酚在茶叶中的含量减少。
2.2 高效液相色谱法测定六堡茶茶多酚的含量
2.2.1 6 种标准品的标准曲线制备
6 种主要茶多酚的标准曲线方程和检测限见表2。
表2 6 种主要茶多酚的标准曲线方程和检测限
Table 2 Linear equations and detection limits of six main tea polyphenols
茶多酚标准品EGC EGCG EC GC GCG ECG标准曲线方程Y=1.01×106X-2 025 Y=7.00×106X-24 907 Y=3.00×106X-5 405.3 Y=1.00×106X-3 271.5 Y=6.00×107X-77 334 Y=9.00×106X-334相关系数R2 0.999 5 0.999 4 0.999 4 0.999 0 0.999 5 0.999 6检测限/（mg/mL）0.02～1.00 0.02～1.00 0.02～1.00 0.02～1.00 0.02～1.00 0.02～1.00
2.2.2 不同年份香型六堡茶茶多酚成分及含量
不同年份香型六堡茶茶多酚成分及含量见表3，色谱图见图2。
表3 不同年份香型六堡茶的茶多酚成分及含量
Table 3 Composition and content of tea polyphenols of Liubao tea from different years and aromatic mg/g
注：-表示未检出。
种类三年槟榔香五年槟榔香十年槟榔香三年陈香五年陈香十年陈香老茶婆EGC 7.870 7 3.157 9 0.669 1 0.683 9 0.339 7 0.593 2 1.548 0 EGCG 22.558 8 13.062 0 9.431 0 2.011 8 2.140 8 2.138 6 1.380 0 EC 6.108 1 4.222 1 1.662 2 1.183 6 1.223 7 2.208 0 0.218 5 GC 4.469 6 2.685 1 2.700 9 5.155 2 5.255 8 3.203 3-GCG 0.092 4 0.079 2 0.084 9 0.072 0 0.074 9 0.074 3 0.075 0 ECG 12.734 7 8.188 1 6.438 1 2.377 0 2.501 3 2.183 3 1.514 6含量总和53.834 3 31.394 4 20.986 2 11.483 5 11.536 2 10.400 4 4.736 1
图2 不同年份香型六堡茶的茶多酚高效液相色谱图
Fig.2 HPLC spectra of tea polyphenols of Liubao tea from different years and aromatic
由表3 可知，槟榔香型的茶叶内所含的茶多酚含量总体大于陈香香型的六堡茶茶叶，以三年槟榔香的六堡茶含量最高，而在槟榔香香型中，以三年槟榔香的茶叶总体茶多酚含量最高，其次是五年槟榔香，十年槟榔香。在陈香工艺中，以五年陈香的茶叶总体茶多酚含量最高，其次是三年陈香、十年陈香。可能是因为在发酵过程中茶叶内所含的茶多酚会随着时间而逐渐分解，因此年份越久，茶叶内所含的茶多酚有所减少。槟榔香和陈香六堡中EGCG、EC、GC 和ECG 含量均高于老茶婆，GC 在老茶婆中未检测到，可能是在渥堆发酵过程中产生的[16]。
2.3 不同年份香型六堡茶茶多酚红外光谱
不同年份香型六堡茶茶多酚红外光谱图见图3。
图3 不同年份香型六堡茶的红外图谱
Fig.3 Infrared spectra of Liubao tea from different years and aromatic
由图3 可以看出，六堡茶的品质关键工序在于渥堆发酵，内含多酚化学成分及含量发生改变，红外谱图呈现规律性变化。六堡茶茶多酚的红外吸收光谱在波数3 290、2 933、1 648、1 452、1 238 cm-1 和1 150 cm-1附近均存在有强吸收峰，波数3 290 cm-1 附近的强宽吸收峰，主要归属于不饱和碳上C—H 或O—H 伸缩振动吸收。2 933 cm-1 附近的吸收峰归属为饱和碳上C—H 伸缩振动吸收。1 648 cm-1 附近吸收峰为
的伸缩振动吸收[17]。在1 452 cm-1 附近的吸收峰归属为饱和碳上C—H 的不对称弯曲振动吸收，在1 238 cm-1 附近的吸收峰归属为酰胺中C—O 伸缩振动吸收[18]。在1 145 cm-1 附近的吸收峰归属为C—O—C 反对称伸缩振动。1 238～1 150 cm-1 区域内两个吸收峰的波数差，在发酵过程的中间阶段开始逐渐减小，1 150cm-1 附近吸收峰发生蓝移。三、五、十年的六堡茶随发酵年份增加，1 517、1 238、1 150 cm-1 附近的吸收峰强度逐渐减小，而1 322 cm-1 附近吸收峰逐渐加强[19]。对比典型红外光谱基团的特征峰情况及六堡茶多酚含量变化分析，可以推测出，1 238、1 150 cm-1附近的吸收峰与六堡茶发酵过程中多酚物质及含量有关，1 322 cm-1 附近吸收峰可能与多酚氧化及聚合产物含量有关[20]。
2.4 六堡茶的抗氧化活性检测
2.4.1 抑制DPPH 自由基活性
自由基清除能力一般以EC50 表示，EC50 是指药物清除率达到50% 所对应的浓度，其值越小，说明清除能力越强[21]。不同年份香型六堡茶的茶多酚对DPPH清除率的EC50 如图4 所示。
图4 不同年份香型六堡茶茶多酚对DPPH 自由基的EC50 值
Fig.4 EC50 values of tea polyphenols of Liubao tea from different years on DPPH free radicals and aromatic
由图4 可知，不同年份香型的六堡茶对DPPH 自由基均有一定的清除作用，但对DPPH 的清除能力存在有差异，三年槟榔香对DPPH 自由基的清除能力最强（EC50 为0.367 4 mg/mL）、五年槟榔香EC50 为0.381 9 mg/mL、十年槟榔香EC50 为1.024 5 mg/mL、三年陈香EC50 为0.662 8 mg/mL、五年陈香EC50 为0.592 5 mg/mL、十年陈香EC50 为0.840 6 mg/mL、老茶婆为1.441 7 mg/mL 在相同条件下，各提取物对DPPH自由基清除能力的强弱顺序为三年槟榔香＞五年槟榔香＞五年陈香＞三年陈香＞十年陈香＞十年槟榔香＞老茶婆。
2.4.2 还原能力
不同年份香型六堡茶茶多酚的还原能力如图5所示。
图5 不同年份香型六堡茶茶多酚的还原能力
Fig.5 Reducing ability of tea polyphenols of Liubao tea from different years and aromatic
由图5 可知，不同年份香型的六堡茶还原能力与浓度呈正相关，随着浓度的增加还原能力也增强。不同年份香型六堡茶的还原能力不同，其中三年槟榔香的还原能力最强，老茶婆还原能力最弱，由强到弱顺序为三年槟榔香＞五年槟榔香＞三年陈香＞五年陈香＞十年槟榔香＞十年陈香＞老茶婆。
3 结论
茶多酚成分及含量影响茶香气风味及其保健养生功效。随着发酵年份的增加，茶多酚含量呈现降低趋势。槟榔香六堡茶的茶多酚含量总体高于陈香型六堡茶。槟榔香和陈香六堡茶中EGCG、EC、GC 和ECG 含量均高于老茶婆。槟榔香和陈香六堡茶中EGCG、EC、GC 和ECG 含量均高于老茶婆，儿茶素没食子酸（GC）在老茶婆中未检出，表明其是在渥堆发酵过程中产生。抗氧化活性测定表明三年槟榔香六堡茶的抗氧化活性最强。研究结果为六堡茶品质及功能产品开发提供参考。
[1] 韦丽萍. 六堡茶质量安全的影响因素及应对措施[J]. 中国食品工业, 2022(10): 88-91.WEI Liping. Influencing factors and countermeasures of quality and safety of Liubao tea[J]. China Food Industry, 2022(10): 88-91.
[2] 王晓. 广西六堡茶化学成分分离、活性分析及茶褐素提取工艺研究[D]. 南宁: 广西师范学院, 2014.WANG Xiao. Study on the separation of chemical constituents, activity analysis and purification process of theabrownins in Liubao tea from guangxi[D]. Nanning: Guangxi Teachers Education University, 2014.
[3] 文玉兰, 宾月景, 邱涛涛, 等. 六堡茶产业高质量发展对策研究——以梧州六堡茶为例[J]. 蚕桑茶叶通讯, 2023(1): 25-27.WEN Yulan, BIN Yuejing, QIU Taotao, et al. Study on high-quality development countermeasures of Liubao tea industry—Taking Liubao tea in Wuzhou as an example[J]. Newsletter of Sericulture and Tea, 2023(1): 25-27.
[4] 张雪红, 谢兰强, 黄淑媛. 辐照和充氧处理对六堡茶中矿物质含量的影响[J]. 食品研究与开发, 2011, 32(9): 23-26.ZHANG Xuehong, XIE Lanqiang, HUANG Shuyuan. Effects of radiation and oxygenation on the contents of mineral composition[J].Food Research and Development, 2011, 32(9): 23-26.
[5] LU Boyang,PUNNUCH Chaipinchana.The customer's satisfaction in marketing mix of Guangxi Wuzhou Ou Shu Liubao Tea Industry Co. Ltd.[J]. Psychology Research, 2022, 12(6):14.
[6] 杨高中, 马士成, 张悦, 等. 陈化六堡茶的主要品质化学成分及其抗氧化活性分析[J]. 山西农业科学, 2022, 50(11): 1519-1526.YANG Gaozhong, MA Shicheng, ZHANG Yue, et al. Analysis of the main quality chemical components of aged Liupao tea and their antioxidant activity[J]. Journal of Shanxi Agricultural Sciences,2022, 50(11): 1519-1526.
[7] PAN W J, LI W S, WU H, et al. Aging-accelerated mouse prone 8(SAMP8) mice experiment and network pharmacological analysis of aged Liupao tea aqueous extract in delaying the decline changes of the body[J]. Antioxidants, 2023, 12(3): 685.
[8] 姜佳星, 阮林浩, 刘焱, 等. 茶叶中茶多酚的特性及在食品中的应用[J]. 茶叶通讯, 2013, 40(1): 10-14.JIANG Jiaxing, RUAN Linhao, LIU Yan, et al. Characteristics of tea polyphenols and its application in food[J]. Tea Communication,2013, 40(1): 10-14.
[9] 杜金杰, 吴新惠, 代雨晴, 等. 渥堆过程六堡茶品质成分分析及茶褐素抗氧化功能研究[J]. 食品工业科技, 2022, 43(6): 50-55.DU Jinjie, WU Xinhui, DAI Yuqing, et al. Quality component analysis and antioxidant function of theabrownins from Liupao tea during fermentation process[J]. Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(6): 50-55.
[10] 高彤彤, 晏志勇. 绿茶提取物茶多酚在化妆品中的抗氧化效果研究[J]. 中国美容医学, 2015, 24(24): 26-29.GAO Tongtong, YAN Zhiyong. Effect of green tea extract antioxidant polyphenols in cosmetics[J]. Chinese Journal of Aesthetic Medicine, 2015, 24(24): 26-29.
[11] 卢莉, 程曦, 张渤, 等. 小种红茶茶多酚和咖啡碱近红外定量分析模型的建立[J]. 茶叶科学, 2020, 40(5): 689-695.LU Li, CHENG Xi, ZHANG Bo, et al. Establishment of predictive model for quantitative analysis of tea polyphenols and caffeine of souchong by near infrared spectroscopy[J]. Journal of Tea Science,2020, 40(5): 689-695.
[12] 于然, 李晔, 金丽华, 等. 高效液相色谱法同时测定茶叶中6 种茶多酚含量[J]. 中国食品添加剂, 2021, 32(5): 74-82.YU Ran, LI Ye, JIN Lihua, et al. Simultaneous determination of 6 kinds of polyphenols in tea by HPLC[J]. China Food Additives,2021, 32(5): 74-82.
[13] CHEN Q S, ZHAO J W, LIU M H, et al. Determination of total polyphenols content in green tea using FT-NIR spectroscopy and different PLS algorithms[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2008, 46(3): 568-573.
[14] QIN W, KETNAWA S, OGAWA Y. Effect of digestive enzymes and pH on variation of bioavailability of green tea during simulated in vitro gastrointestinal digestion[J]. Food Science and Human Wellness, 2022, 11(3): 669-675.
[15] 张建勇, 王伟伟, 崔宏春, 等. 温度对茶多酚制品中儿茶素、没食子酸和咖啡碱贮藏稳定性的影响[J]. 中国茶叶加工, 2020(4):69-75.ZHANG Jianyong, WANG Weiwei, CUI Hongchun, et al. Effect of temperature on storage stability of tea catechins, gallic acid and caffeine in tea polyphenols products[J]. China Tea Processing, 2020(4): 69-75.
[16] HUA J J, WANG H J, YUAN H B, et al. New insights into the effect of fermentation temperature and duration on catechins conversion and formation of tea pigments and theasinensins in black tea[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2022, 102(7):2750-2760.
[17] VADAKKEQULPPARA Ramachandran Nair Sinija,HARI Niwas Mishra.Total polyphenols in green tea samples by FT-NIR spectroscopy[J]. Fresh Produce, 2009, 3(1):76-80.
[18] 董春旺, 梁高震, 安霆, 等. 红茶感官品质及成分近红外光谱快速检测模型建立[J]. 农业工程学报, 2018, 34(24): 306-313.DONG Chunwang, LIANG Gaozhen, AN Ting, et al. Near-infrared spectroscopy detection model for sensory quality and chemical constituents of black tea[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering, 2018, 34(24): 306-313.
[19] REN G X, WANG S P, NING J M, et al. Quantitative analysis and geographical traceability of black tea using Fourier transform nearinfrared spectroscopy (FT-NIRS)[J]. Food Research International,2013, 53(2): 822-826.
[20] REN G X, LIU Y, NING J M, et al. Assessing black tea quality based on visible-near infrared spectra and kernel-based methods[J].Journal of Food Composition and Analysis, 2021, 98(1): 103810.
[21] 邹艳丽, 陈靖, 李聪, 等. 普洱生茶和熟茶茶多酚的提取及抗氧化活性研究[J]. 安徽农业科学, 2012, 40(8): 4850-4851.ZOU Yanli, CHEN Jing, LI Cong, et al. Study on the extraction and antioxidant activities of Pu-Er crude tea and Pu-Er ripe tea polyphenol[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2012, 40(8):4850-4851.