新疆是我国最大的优质红枣种植基地，占全国红枣种植面积的40% 以上，主要种植品种有骏枣、灰枣和冬枣等[1]。蟠枣是通过嫁接培育出的新型冬枣品种，因其果实形状类似于蟠桃而得名。蟠枣较一般冬枣品质更佳，可溶性固形物含量达30% 左右，单果均重40 g 左右，果实横径超过55 mm，亩产可达1 500～2 500 kg。此外，蟠枣各种有机物与维生素含量超过其他冬枣，且抗枣炭疽病、轮纹病、缩果病、抗裂果均明显高于其他红枣品种，全红裂果率不超过5%，具有产量高、品质优良、外形独特、口感脆甜等特点。目前，蟠枣主要种植地区在陕西、山西、新疆等地，是珍稀枣果品种[2-3]。然而，蟠枣与其它冬枣品种理化特性相似，果皮极薄且含水量高，采摘及贮运过程中易造成机械损伤，加之新疆地域辽阔，延长了蟠枣的运输时间，使其易出现失水皱缩、酒化软化、病菌侵染霉化等问题，导致蟠枣降低甚至失去原有的经济价值，严重制约蟠枣的市场供应和产业发展[4-5]。因此，如何将保鲜技术用于蟠枣的采后贮运，保证其贮藏品质、延长货架期成为亟待解决的问题。
H2O2 是一种无色、无味的强氧化剂，在食品行业主要用于物品或环境的杀菌、消毒等。高浓度的H2O2具有强腐蚀性，但适宜浓度的H2O2 可杀死附着在果实表面的病原微生物，防止病菌侵染，且可以提高果实的抗氧化能力，达到果蔬贮藏保鲜的目的。H2O2 属于相对绿色的化学保鲜剂，具有无污染、效果好、无残留等优点，因此在果蔬保鲜技术中具有较好的应用前景[6-7]。研究表明，H2O2 对伽师瓜[7]、‘黄冠’梨[8]、香蕉[9]等均有明显的保鲜作用，可明显提高果实的贮藏品质并延长贮藏期。然而，H2O2 处理对冬枣贮藏期间品质变化的研究却鲜有报道。
微孔保鲜袋是一种具有气调功能的保鲜包装袋，具有较高透气性，可以及时排出高浓度CO2，保持袋内空气相对湿度，防止果实失水皱缩、病菌增生，从而降低贮运腐烂率、延长贮藏期[10]。目前，许多研究学者对不同保鲜袋在不同果蔬贮藏保鲜上的应用效果已开展了研究，但应用尚未全面推广，还需进一步研究。因此，本试验以新疆蟠枣为试验材料，比较冷库直冷和压差预冷效果，并研究H2O2 纳米雾化结合微孔保鲜袋包装处理对蟠枣贮藏品质和抗氧化酶活性的影响，以期为新疆蟠枣的贮藏保鲜提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
新疆蟠枣，采自新疆第三师图木舒克市50 团果园，要求成熟度一致、色泽、大小均一、无机械损伤、无病虫害。蟠枣在树下阴凉处采摘，采后于果园中直接放置周转筐内，立即运至图木舒克市绿糖心冬枣种植专业合作社保鲜库。
冬枣专用PE 微孔保鲜袋（350 mm×450 mm、厚度0.01 mm）：潍坊百乐源保鲜包装有限公司；绿诺鲜1-MCP 保鲜剂（0.8 g/包）：乌鲁木齐市格瑞德保鲜科技有限公司；L-抗坏血酸（标准品）：天津市致远化学试剂有限公司；H2O2、次氯酸钠、无水乙醇、盐酸、草酸、2，6-二氯靛酚（均为分析纯）：国药集团化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
原位压差快速预冷装置（ZL202223278142.3）、H2O2 纳米雾化熏蒸设备（ZL202123092987.9）：新疆农垦科学院果蔬保鲜团队自主研制；低温冷库：图木舒克市绿糖心冬枣种植专业合作社；GY-4 果实硬度计：浙江乐清市爱德堡仪器有限公司；WAY-Z 自动阿贝折光仪：上海精密科学仪器有限公司；X3R 高速冷冻离心机：美国赛默飞世尔科技有限公司；UV-2600 紫外可见分光光度计：岛津中国有限公司；EL3002 型电子天平：梅特勒-托利多仪器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 果实处理
首先比较冷库直冷和压差预冷两种方式对蟠枣果实的降温效果，预冷量为5 t，温度监控器摆放位置分别为压差预冷前、中、后方位的蟠枣框内，对照组摆放位置为冷库直冷蟠枣框不同方位，3 个位置温度取平均值。将压差预冷后的蟠枣随机分为3 组，每组20 框（2 kg/框）：对照组（不套保鲜袋）、保鲜袋组、保鲜袋+1% H2O2 纳米雾化熏蒸组。熏蒸处理是在密闭条件下将蟠枣用1% H2O2 纳米雾化熏蒸5 min 后于阴凉处自然晾干。处理后的蟠枣果实装入0.01 mm 微孔保鲜袋，放入绿诺鲜1-MCP 保鲜剂1 包/框，封严袋口并置于塑料框中，在温度（0±1）℃、相对湿度约90%的条件下于冷库内贮藏90 d。贮藏期内间隔15 d 取样1 次，测定贮藏品质、营养成分含量及抗氧化活性等，所有试验进行3 次重复。
1.3.2 理化指标及抗氧化活性的测定
1.3.2.1 腐烂率的测定
随机抽取30 个果实，以出现明显腐烂、霉变或机械伤作为标准统计每次抽取所得腐烂数量，腐烂率（Y，%）的计算公式如下。
Y=（X/X1）×100
式中：X 为腐烂果实数；X1 为抽取冬枣果实总数。
1.3.2.2 软果率的测定
随机抽取30 个果实，肉眼观测以出现明显皱缩作为标准，统计每次抽取所得软果数[11]，软果率（Y，%）的计算公式如下。
Y=（X/X1）×100
式中：X 为软果数；X1 为抽取冬枣果实总数。
1.3.2.3 转红指数测定
设定果实表皮无红色面积为0 级，0%～25% 为1 级，25%～50%为2 级，50%～75%为3 级，75%～100%为4 级，统计并计算转红指数[12]。转红指数（Y，%）的计算公式如下。
Y=∑（X×X1）/（X2×X3）×100
式中：X 为红变级别；X1 为本级别果实数；X2 为最高级别；X3 为抽取冬枣果实总数。
1.3.2.4 失重率测定
采用称重法，随机选取30 个冬枣果实进行称重作为贮前质量，每隔15 d 进行称重作为贮后质量，失重率（Y，%）的计算公式如下。
Y=（X-X1）/X×100
式中：X 为贮前质量，g；X1 为贮后质量，g。
1.3.2.5 硬度测定
采用手持硬度计法测定，每个处理随机抽取10 个果实，每个果实于上、中、下3 个部位测定，以硬度计探针进入果肉0.5 cm 为准，取10 个果实硬度值的平均值作为该处理组的硬度。
1.3.2.6 营养成分含量测定
参照贺宇龙[13]的方法分别测定蟠枣果实的可溶性固形物（total soluble solid，TSS）含量、维生素C（vitamin C，VC）含量。
1.3.2.7 抗氧化酶活性测定
过氧化氢酶（catalase，CAT）活性参照Fan 等[14]的方法测定；抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）活性参照Zhou 等[15]的方法测定。
1.4 数据统计与分析
试验结果采用3 次重复平均值±标准差表示，试验数据采用Origin 8.5 软件整理作图并进行相关性分析，通过SPSS 19.0 软件对结果进行显著性分析（P＜0.05）。
2 结果与分析
2.1 不同预冷方式对蟠枣预冷效果比较
预冷是冷链物流“最先一公里”的重要组成部分，也是果蔬采后保持产品质量的关键控制环节，研究表明果蔬采后在24 h 内降至0 ℃可以充分释放田间热，快速降低果蔬的呼吸强度，起到延缓果实后熟衰老的作用[16]。原位压差预冷是在预冷库的基础上运用压差设备加速果实的空气循环使其快速降温。原位压差预冷效果见图1。
图1 原位压差预冷效果
Fig.1 Effect of in situ differential pressure precooling
*表示存在显著性差异（P＜0.05）。
由图1 可知，原位压差预冷效果显著优于冷库直冷（P＜0.05），预冷量为5 t 时从室温降至2 ℃用时3 h，比冷库直冷快51.3%。此外，通过对比不同位置温度下降情况，发现空气流动的前端降温速度优于中端和后端位置。结果表明，原位压差预冷可以显著提高蟠枣果实降温速度。
2.2 不同处理对蟠枣腐烂率、软果率的影响
腐烂率和软果率是衡量果实品质和保鲜效果的重要指标。不同处理对蟠枣腐烂率、软果率的影响结果见图2。
图2 不同处理对蟠枣腐烂率、软果率的影响
Fig.2 Effects of different treatments on rot rate and soft fruit rate of Panzao
a.腐烂率；b.软果率。与对照组相比,*表示存在显著性差异（P＜0.05）；**表示存在极显著性差异（P＜0.01）。
由图2a 可知，随贮藏时间的延长，不同处理蟠枣果实腐烂率均呈升高的趋势，处理组的蟠枣腐烂率上升速度较慢，与对照组差异极显著（P＜0.01）。贮藏时间为30 d 时，对照组、保鲜袋组、保鲜袋+H2O2 组蟠枣果实的腐烂率分别为7.5%、2.7%、0%，贮藏至90 d 时，3 组果实的腐烂率分别为39.8%、21.2%、10.3%。
由图2b 可知，不同处理蟠枣果实的软果率随贮藏时间的延长均呈升高的趋势，贮藏至90 d 时，对照组、保鲜袋组、保鲜袋+H2O2组蟠枣的软果率分别为62.1%、37.3%、16.3%，差异极显著（P＜0.01）。结果表明，整个贮藏期内处理组较对照组均显著减缓了蟠枣果实的腐烂和软化，保鲜袋结合H2O2 雾化处理能更好地保持蟠枣的采后贮藏品质。
2.3 不同处理对蟠枣转红指数的影响
果皮的颜色可以直观判断果实的成熟度，对于鲜食蟠枣而言，转红指数越高表明蟠枣的后熟程度越高，感官品质下降[17]。不同处理对蟠枣转红指数的影响见图3。
图3 不同处理对蟠枣转红指数的影响
Fig.3 Effects of different treatments on the reddening index of Panzao
*表示与对照组相比存在显著性差异（P＜0.05）。
如图3 所示，随着贮藏时间的延长，不同处理组蟠枣的转红指数均呈升高的趋势，且贮藏前期上升速度较小，在45 d 后急剧上升。贮藏至90 d 时，对照组、保鲜袋组、保鲜袋+H2O2 组转红指数分别为81.8%、72.5%、75.4%，表明保鲜处理可抑制蟠枣果皮的红变，延缓果实的后熟。
2.4 不同处理对蟠枣失重率、硬度的影响
失重率和硬度是评价蟠枣果实软化程度和商品价值的主要指标，决定了蟠枣的脆度[18]。不同处理对蟠枣失重率、硬度的影响见图4。
图4 不同处理对蟠枣失重率、硬度的影响
Fig.4 Effects of different treatments on weight loss and hardness of Panzao
a.失重率；b.硬度。与对照组相比，*表示存在显著性差异（P＜0.05）；**表示存在极显著性差异（P＜0.01）。
由图4a 可以看出，不同处理蟠枣果实失重率随贮藏时间的延长逐渐上升，且对照组的失重率上升速率较快，较处理组差异极显著（P＜0.01）。贮藏90 d 时，对照组、保鲜袋组、保鲜袋+H2O2 组蟠枣失重率分别为11.3%、5.1%、4.2%。表明保鲜袋结合H2O2 纳米雾化能抑制果实的采后失水，能够保持商品价值。
由图4b 可以看出，贮藏期两个处理组蟠枣果实硬度下降速率均较对照组低，其中保鲜袋+H2O2 组硬度下降速率最低，贮藏90 d 时蟠枣果实硬度为6.8 kg/cm2，较贮藏前下降了18.1%，对照组较贮藏前下降了48.2%。结果表明，微孔保鲜袋可以显著抑制果实的后熟和失水软化，且复合H2O2 雾化处理效果最佳，与软果率结果一致。
2.5 不同处理对蟠枣TSS、VC 含量的影响
TSS 含量是评价蟠枣果实感官品质的重要指标，VC 是一种水溶性维生素，可清除果实内的自由基，抑制氧化反应，对果实起保护作用[19]。不同处理对蟠枣TSS、VC 含量的影响见图5。
图5 不同处理对蟠枣TSS、VC 含量的影响
Fig.5 Effects of different treatments on TSS and VC content of Panzao
a.TSS 含量；b.VC 含量。与对照组相比，*表示存在显著性差异（P＜0.05）；**表示存在极显著性差异（P＜0.01）。
如图5a 所示，随着贮藏时间的延长，不同处理蟠枣TSS 含量整体呈先上升后下降趋势，对照组15 d 时达到峰值31.8%，保鲜袋组45 d 时达到峰值31.9%，保鲜袋+H2O2组贮藏60 d 时蟠枣TSS 含量最高为31.5%，说明保鲜处理均延缓了TSS 高峰的出现；贮藏末期，处理组TSS 含量显著高于对照组（P＜0.05），且结合H2O2雾化效果更好。
由图5b 可以看出，随着贮藏时间的延长，不同处理蟠枣果实VC 含量呈下降的趋势，对照组较两个处理组下降速度快，且差异极显著（P＜0.01）；处理组之间无显著差异。贮藏90 d 时，保鲜袋+H2O2 组VC 含量下降17.1%。结果表明，保鲜袋处理能显著抑制蟠枣VC 含量的下降，抑制果实氧化维持采后品质。
2.6 不同处理对蟠枣抗氧化酶活性的影响
CAT、APX 是果实活性氧代谢过程中重要的抗氧化酶，通过防御活性氧对果实组织系统的伤害，延缓衰老腐败进程[20]。不同处理对蟠枣抗氧化酶活性的影响见图6。
图6 不同处理对蟠枣抗氧化酶活性的影响
Fig.6 Effects of different treatments on antioxidant enzyme activities of Panzao
a.CAT 活性；b.APX 活性。与对照组相比，*表示存在显著性差异（P＜0.05）；**表示存在极显著性差异（P＜0.01）。
由图6a 可以看出，不同处理蟠枣果实CAT 活性在贮藏过程中均呈现先上升后下降趋势。贮藏至45 d时，不同处理组CAT 活性均达到最大值，且处理组显著高于对照组（P＜0.05）。贮藏90 d 时，对照组、保鲜袋组、保鲜袋+H2O2 组蟠枣CAT 活性分别为134.55、156.80、164.38 U。
由图6b 可以看出，不同处理蟠枣果实APX 活性在贮藏过程中均呈现先上升后下降趋势。贮藏至30 d时，对照组、保鲜袋组APX 活性均达到最大值；贮藏至45 d 时，保鲜袋+H2O2 组蟠枣APX 活性达到最大值（142.50 U），与对照组差异极显著（P＜0.01）。相比于对照和保鲜袋处理，保鲜袋+H2O2 雾化能更好地维持蟠枣CAT 活性和APX 活性，从而抑制活性氧对细胞的胁迫，保持蟠枣贮藏品质，保鲜效果最佳。
2.7 不同处理蟠枣品质指标与抗氧化酶的相关性分析
不同处理蟠枣品质指标与抗氧化酶的相关性分析见图7。
图7 不同处理蟠枣品质指标与抗氧化酶的相关性分析
Fig.7 Correlation analysis between quality indexes and antioxidant enzymes of Panzao under different treatments
**表示在0.01 水平上极显著相关；*表示在0.05 水平（双侧）上显著相关。
由图7 可知，与蟠枣品质相关的9 项指标之间均呈显著正相关或负相关（P＜0.05），表明蟠枣品质与理化性质和抗氧化能力密切相关。其中，果实腐烂率与软果率、转红指数、失重率均呈极显著正相关（P＜0.01），其相关系数分别为0.98、0.82 和0.99；与硬度、TSS 含量、VC 含量、CAT 活性、APX 活性均呈极显著负相关（P＜0.01），其相关系数分别为-0.95、-0.77、-0.98、-0.59、-0.61。此外，转红指数与软果率和失重率均呈极显著正相关（P＜0.01），相关系数分别为0.86、0.84，与硬度、VC 含量均呈极显著负相关（P＜0.01），相关系数分别为-0.82、-0.74。结果表明，蟠枣采后果实发生后熟和衰老的同时，伴随着果皮红变、失水软化、生物活性物质的降解，与Tang 等[21]的研究结果一致。此外，CAT 活性、APX 活性与TSS 含量、VC 含量均呈极显著正相关（P＜0.01），可能是抗氧化酶利用VC 和H2O2 作为底物产生脱氢VC，而TSS 可为酶促反应提供能量来源，这表明酶和非酶抗氧化系统之间存在一定的相互作用来抑制活性氧对组织的氧化损伤[22]。CAT 活性与APX 活性呈极显著正相关（P＜0.01），相关系数为0.81，表明抗氧化酶之间可能形成连锁反应，对清除自由基、维持抗氧化能力、延长贮藏期等方面起重要作用[23]。
3 结论
试验结果表明，与冷库直冷相比，原位压差预冷可以显著提高蟠枣果实采后降温速度，从而实现快速降温。预冷后在绿诺鲜1-MCP 保鲜剂处理的前提下，通过微孔保鲜袋结合H2O2 纳米雾化处理的蟠枣果实在贮藏过程中能有效保持其色泽和硬度，延缓失水软化、果皮皱缩和TSS、VC 等营养物质含量的下降，保持其抗氧化酶活性，从而抑制果实氧化损伤、衰老腐败，保持其采后的商品价值。通过相关性分析结果发现，蟠枣果实各项品质指标和抗氧化酶活性相互之间关系显著。综上所述，本试验结果可作为一种有效的贮藏保鲜技术应用于蟠枣的贮运保鲜。
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