沙棘(Hippophae rhamnoides L.)为胡颓子科沙棘属落叶多刺乔木,多分布在欧洲和亚洲。全球野生沙棘和人工沙棘的面积约为300 万hm2,其中约85% 在中国,其次是蒙古、印度和巴基斯坦[1]。沙棘果实可被作为药材使用,同时沙棘叶在中国作为食品和药材使用也有很长的历史。沙棘叶是多酚[2-4]、黄酮、精油[5]、类胡萝卜素[6]、生育酚、糖和抗坏血酸[7]等生物活性物质的丰富来源。沙棘叶提取物具有抗氧化、降血糖、抗病毒、抗菌、减肥、抗炎和抗肿瘤等活性[8-13],因此,沙棘叶被广泛用于制造茶叶、动物饲料、药品和化妆品等[14-15]。目前,对沙棘叶中的黄酮成分提取分离研究较多[16-19],沙棘叶茶作为其主要产品形式之一,对其活性成分提取的研究并不多见。
本文将沙棘叶茶和沙棘叶茶粉分别采用不同溶剂在不同温度(55、75、95 ℃)下进行提取,得到沙棘叶茶和茶粉提取物,测定其清除1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基、亚硝酸根的能力和还原力、体外α-糖苷酶抑制活性、异鼠李素、总黄酮和总多酚含量,并进行相关性分析、主成分分析,以期为沙棘叶茶开发利用及茶叶冲泡提供参考。
沙棘叶:采自山西省吕梁市方山县,经忻州师范学院赵三虎教授鉴定为胡颓子科沙棘属落叶多刺乔木沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的叶;没食子酸标准品(色谱纯)、芦丁标准品(色谱纯)、异鼠李素标准品(色谱纯)、对硝基苯基-α-D-葡萄糖苷(p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside,PNPG)(生物试剂)、α-葡萄糖苷酶(70 U/mg,生物试剂)、DPPH(生物试剂):上海源叶生物科技有限公司;甲醇(色谱纯):天津市光复精细化工研究所。
1100 高效液相色谱仪:美国Agilent 公司;DNZ-9806 型酶标分析仪:北京普朗新技术有限公司;V-1200 型分光光度计:上海美浦达仪器有限公司;TG-16离心机:常州市万合仪器制造有限公司;RE-52AA 旋转蒸发器:上海亚荣生化仪器厂;DF-101S 集热式数显恒温磁力搅拌器:山东鄄城华鲁电热仪器有限公司。
1.2.1 沙棘叶茶水分含量测定及其提取物的制备
将现采沙棘鲜叶,用流水清洗,然后用蒸馏水洗净,沥干水分,经锅炒杀青(温度150 ℃)3 min、揉捻成条状、烘箱60 ℃烘干后制成沙棘叶茶样品。
沙棘叶茶中水分含量按照《中华人民共和国药典》2020 年版水分测定法的第二法中烘干法[20]测定。根据减失的质量,计算沙棘叶茶样品中水分含量(%)。
将制备的沙棘叶茶样品平均分两份,其中一份粉碎过60 目筛,制成沙棘叶茶粉,另一份不做处理。称取原料5 g,以料液比1∶20(g/mL)加入溶剂,溶剂分别为超纯水和60%乙醇,在不同温度(55、75、95 ℃)下回流提取,连续提取3 次,每次提取时间分别为4、3、2 h,合并3 次提取液,旋转蒸发浓缩后用提取溶剂定容至75 mL,得沙棘叶茶提取物样品,于-18 ℃保存备用。样品具体制备信息和编号见表1。
表1 沙棘叶茶提取物样品制备信息和编号
Table 1 Preparation information and numbering of sea buckthorn leaf tea extracts
原料沙棘叶茶提取溶剂超纯水60%乙醇沙棘叶茶粉超纯水60%乙醇提取温度/℃55 75 95 55 75 95 55 75 95 55 75 95样品SBLT-W-55 SBLT-W-75 SBLT-W-95 SBLT-E-55 SBLT-E-75 SBLT-E-95 SBLTP-W-55 SBLTP-W-75 SBLTP-W-95 SBLTP-E-55 SBLTP-E-75 SBLTP-E-95
1.2.2 沙棘叶茶提取物总黄酮含量测定
总黄酮含量测定参照Chen 等[21]方法。在510 nm处测定吸光度,以不同浓度的芦丁(1.344×10-3~6.721×10-3 mg/mL)为对照品绘制标准曲线(y=1.235 1x+0.043 1,R2=0.999 1),总黄酮含量以芦丁当量mg/g 样品干重计。
1.2.3 沙棘叶茶提取物可溶性总多酚含量测定
可溶性总多酚含量测定采用福林酚法[22]。在690 nm下测定吸光度,以不同浓度的没食子酸(7.07×10-3~4.24×10-2 mg/mL)为对照品绘制标准曲线(y=36.878x+0.048 5,R2=0.998 7),可溶性总多酚含量以没食子酸当量mg/g样品干重计。
1.2.4 沙棘叶茶提取物异鼠李素含量测定
异鼠李素含量测定参照文献[20]的方法并稍作修改。取沙棘叶茶提取物(350 μL),与12 mol/L HCl(350 μL)于10 mL 螺口瓶中混合。将混合液于75 ℃下孵育1 h,冷却至室温后,向其中加入4.3 mL 无水乙醇,用于测定异鼠李素的含量。
色谱条件:色谱柱Kromasil 100-5 C18(250 mm ×4.6 mm,5 μm);柱温25 ℃;流动相为甲醇-0.4% 磷酸(58∶42,体积比);流速1 mL/min;检测波长370 nm。样品在进样前先过0.22 μm 滤膜,进样量10 μL。以不同浓度异鼠李素(0.000 5~0.002 0 mg/mL)为对照品绘制标准曲线(y=3×109x+18 186,R2=0.999 6)。
1.2.5 沙棘叶茶提取物DPPH 自由基清除能力测定
DPPH 自由基清除能力测定参照Chen 等[21]方法。向试管中加入不同浓度的沙棘叶茶提取物600 μL,分别与300 μL DPPH 溶液混合。在黑暗中放置20 min后,在517 nm 处测定吸光度。以60%乙醇代替提取液作为空白对照。以浓度为横坐标,清除率为纵坐标作图,计算半数清除率EC50。DPPH 自由基清除率(X,%)计算公式如下。
式中:A0 为60% 乙醇吸光度;A1 为沙棘叶茶提取物吸光度。
1.2.6 沙棘叶茶提取物羟基自由基清除能力测定
羟基自由基清除能力按照Chen 等[21]方法测定。
1.2.7 沙棘叶茶提取物亚硝酸根清除能力测定
亚硝酸根清除能力按照Chen 等[21]方法测定。
1.2.8 沙棘叶茶提取物还原力测定
还原力测定按照Chen 等[21]方法测定。
1.2.9 沙棘叶茶提取物α-糖苷酶抑制能力测定
α-糖苷酶抑制活性测定参照Miao 等[23]方法并稍作修改。向试管中加入不同浓度的沙棘叶茶提取物100 μL,分别加入60 μL α-葡萄糖苷酶溶液(5 U/mL),350 μL 磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L,pH6.8)。在37 ℃下孵育10 min 后,加入10 μL、10 mmol/L PNPG 溶液,混合物在37 ℃下孵育30 min 后加入500 μL 碳酸钠(0.5 mol/L)终止反应,在405 nm 下测定吸光度。以超纯水代替提取液为空白对照。以浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,计算半数抑制率IC50,α-葡萄糖苷酶抑制率(Y,%)的计算公式如下。
式中:A0 为超纯水吸光度;A1 为沙棘叶茶提取物吸光度。
所有试验重复测定3 次,结果以平均值±标准差表示。使用IBM SPSS Statistics 20 对数据进行显著性分析和统计分析。
沙棘叶茶样品中水分含量为(5.56±0.17)%,符合国标中茶叶水分含量低于7%的要求[24]。
不同形态沙棘叶茶在不同温度、不同提取溶剂中总黄酮含量见图1。
图1 不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中总黄酮含量
Fig.1 Content of total flavonoids in sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图1 可以看出,沙棘叶茶提取物总黄酮含量在27.28~82.59 mg/g,不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中总黄酮含量有显著性差异,在相同提取温度、提取溶剂中,沙棘叶茶粉中总黄酮含量显著高于沙棘叶茶中总黄酮含量,在同一提取温度、不同提取溶剂下,60%乙醇提取物中总黄酮含量显著高于超纯水提取物中总黄酮含量,同种形态、同种溶剂,随着提取温度的升高,沙棘叶茶提取物中总黄酮含量增多。总黄酮含量最高的是SBLTP-E-95,总黄酮含量为(82.59±1.80)mg/g,其次是SBLTP-E-75[(63.89±1.99)mg/g]、SBLT-E-95[(62.70±1.46)mg/g]、SBLTP-E-55[(58.94±1.96)mg/g]、SBLT-E-75[(54.97±0.25)mg/g]和SBLTP-W-95[(53.74±2.21)mg/g]。结果表明,在粉状、60%乙醇为提取溶剂,95 ℃时对总黄酮提取效果最佳。泡茶时,开水冲泡,茶包较茶叶中可溶出黄酮含量更高。Kılıç等[25]发现绿茶、番泻叶、玉米须、迷迭香中总黄酮提取率随着温度升高而升高,在100 ℃时最高。
不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中可溶性总多酚含量见图2。
图2 不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中可溶性总多酚含量
Fig.2 Content of total soluble polyphenols in sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图2 可以看出,沙棘叶茶提取物可溶性总多酚含量在58.02~117.02 mg/g,不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中可溶性总多酚含量有显著性差异。同一提取温度、不同提取溶剂相比,60%乙醇提取物中可溶性总多酚含量显著高于超纯水提取物中可溶性总多酚含量,同种形态、同种溶剂,随着提取温度的升高,沙棘叶茶提取物中可溶性总多酚含量也随之增多。在同一溶剂中,95 ℃时沙棘叶茶和沙棘叶茶粉中可溶性总多酚含量相差较小,排序为SBLTP-E-95、SBLT-E-95、SBLTP-E-75、SBLT-E-75、SBLTP-E-55、SBLTP-W-95。结果表明,可溶性总多酚提取以60%乙醇为提取溶剂,95 ℃时不管状态是粉状还是完整茶叶,提取效果均较好。泡茶时,开水冲泡,茶包较茶叶中可溶性总多酚含量更高。王彬等[26]研究发现茶多酚含量随冲泡温度的升高而明显增加。
不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中异鼠李素含量见图3。
图3 不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂中异鼠李素含量
Fig.3 Content of isorhamnetin in sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图3 可知,沙棘叶茶提取物异鼠李素含量为0.505~1.592 mg/g,异鼠李素含量最高的是SBLTP-E-95(1.592±0.074)mg/g,其次是SBLTP-E-75[(1.444±0.052)mg/g]、SBLTP-E-55[(1.429±0.031)mg/g]、SBLT-E-95[(1.347±0.015)mg/g]、SBLT-E-75[(1.275±0.010)mg/g]、SBLT-E-55[(1.196±0.063)mg/g]。对于水提样品,样品形态对异鼠李素含量无显著性影响,同种形态,随着提取温度的升高,沙棘叶茶提取物中异鼠李素含量也在增多。结果表明,60%乙醇提取物中异鼠李素含量显著高于纯水提取物中异鼠李素含量。沙棘叶茶粉、60%乙醇为提取溶剂、95 ℃时异鼠李素提取效果最佳。泡茶时,开水冲泡,茶粉和茶叶无明显差异。
沙棘叶茶提取物对DPPH 自由基的半数清除率EC50 见图4。
图4 不同形态沙棘叶茶在不同提取温度、不同提取溶剂提取物清除DPPH 自由基的能力
Fig.4 Scavenging abilities of sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures against DPPH free radicals
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图4 可知,沙棘叶茶提取物对DPPH 自由基的EC50值范围在0.141 9~0.338 7 mg/g。对DPPH 自由基的EC50 值最小的是SBLTP-E-95(0.141 9±0.000 6)mg/g,其次是SBLT-E-95(0.160 8±0.007 4)mg/g,SBLT-E-75对DPPH 自由基的EC50 值为(0.169 5±0.006 7)mg/g,SBLTP-E-75 对DPPH 自由基的EC50 值为(0.169 9±0.012 3)mg/g,SBLTP-W-95 对DPPH 自由基的EC50 值为(0.175 0±0.002 6)mg/g,SBLT-E-55 对DPPH 自由基的EC50 值为(0.210 3±0.011 3)mg/g。EC50 值越小,对DPPH 自由基清除能力越强,故粉状沙棘叶茶在60%乙醇为提取溶剂,95 ℃时清除DPPH 自由基的能力最强。95 ℃时沙棘叶茶粉水提物对于DPPH 自由基也有较强的清除能力,泡茶时,开水冲泡,沙棘叶茶粉较整茶中溶出物对于DPPH 自由基清除能力强。
沙棘叶茶提取物对羟基自由基的半数清除率EC50见图5。
图5 不同形态沙棘叶茶在不同温度、不同提取溶剂提取物清除羟基自由基的能力
Fig.5 Scavenging abilities of sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures against hydroxyl free radicals
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图5 可知,沙棘叶茶提取物对羟基自由基的EC50值范围在0.357 1~0.750 3 mg/g。SBLTP-E-95、SBLTPW-95、SBLT-E-95、SBLTP-W-75、SBLT-W-95、SBLT-W-75、SBLTP-W-55 对羟基自由基的EC50 值为(0.357 1±0.004 8)、(0.381 5±0.005 6)、(0.396 2±0.005 5)、(0.446 2±0.001 5)、(0.454 6±0.005 7)、(0.540 4±0.009 6)、(0.572 8±0.015 3)mg/g。EC50 值越小,对羟基自由基清除能力越强,故在95 ℃、60% 乙醇为提取溶剂时沙棘叶茶粉和整茶,以及水为提取溶剂时沙棘叶茶粉提取物均具有较强的清除羟基自由基的能力。并且在清除羟基自由基的试验中,水作为提取溶剂时,沙棘叶茶粉提取物具有较强的清除羟基自由基的能力。泡茶时,开水冲泡,沙棘叶茶粉较整茶溶出物对于羟基自由基清除能力更强。
沙棘叶茶提取物对亚硝酸根的半数清除率EC50 值见图6。
图6 不同形态沙棘叶茶在不同温度、不同提取溶剂提取物清除亚硝酸根的能力
Fig.6 Scavenging abilities of sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures against nitrite
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
如图6 所示,沙棘叶茶提取物对亚硝酸根清除EC50 值在0.815 6~1.727 8 mg/g,SBLTP-E-95、SBLTP-E-75、SBLT-W-95、SBLTP-E-55、SBLT-E-95、SBLTP-W-95、SBLT-E-75、SBLTP-W-75 对亚硝酸根清除的EC50值为(0.815 6±0.001 3)、(0.857 8±0.002 5)、(0.981 2±0.038 7)、(1.065 2±0.021 3)、(1.072 3±0.001 4)、(1.074 1±0.035 8)、(1.119 4±0.006 3)、(1.122 1±0.021 1)mg/g。EC50 值越小,清除亚硝酸根能力越强,故沙棘叶茶粉在以60%乙醇为提取溶剂,提取温度95 ℃或75 ℃时具有较强的清除亚硝酸根能力。95 ℃时沙棘叶茶粉和整叶的水提物、沙棘叶茶整叶的60% 乙醇提取物,以及55 ℃时沙棘叶茶粉60%乙醇提取物有较强的清除亚硝酸根能力。泡茶时,开水冲泡,沙棘叶整茶和茶粉溶出物均有较强的亚硝酸根清除能力。
沙棘叶茶提取物还原力测定结果见图7。
图7 不同形态沙棘叶茶在不同温度、不同提取溶剂提取物还原力
Fig.7 Reducing power of sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图7 可知,沙棘叶茶提取物还原力在52.87~118.65 mg/g。同一提取溶剂、同一温度下,沙棘叶茶粉提取物较沙棘叶整茶具有更强的还原力;同一温度下,沙棘叶茶60% 乙醇提取物较沙棘叶水提物还原力较强;同一提取溶剂,随着提取温度提高,提取物还原力增强。具有最强还原力的是SBLTP-E-95(118.65±2.40)mg/g,其次是SBLTP-E-75(113.47±1.23)mg/g,SBLT-E-95 还原力为(106.69±1.45)mg/g,SBLT-E-75 为(96.71±1.81)mg/g,SBLTP-W-95 为(89.16±0.20)mg/g,SBLTP-E-55 为(86.14±0.83)mg/g,SBLT-W-95 为(84.97±0.53)mg/g。结果表明,沙棘叶茶粉在95 ℃、60%乙醇为溶剂时具有最强还原力。泡茶时,开水冲泡,沙棘叶整茶和茶粉溶出物均有较强的还原力。
沙棘叶茶提取物对α-糖苷酶抑制能力IC50 见图8。
图8 不同形态沙棘叶茶在不同温度、不同提取溶剂提取物抑制α-糖苷酶的能力
Fig.8 Inhibitory activities of sea buckthorn leaf tea extracts prepared with different solvents at different temperatures against α-glucosidase
不同小写字母表示存在显著性差异,P<0.05。
由图8 可知,沙棘叶茶提取物对α-糖苷酶抑制作用IC50 值在0.393 0~0.798 4 mg/g。SBLTP-E-95、SBLTP-E-75、SBLT-E-95、SBLT-W-95、SBLTP-E-55 对α-糖苷酶抑制作用IC50 值为(0.393 0±0.010 1)、(0.444 8±0.007 0)、(0.498 0±0.001 1)、(0.506 5±0.008 5)、(0.522 8±0.007 1)mg/g。IC50 值越小,对α-糖苷酶抑制能力越强,沙棘叶茶粉在95 ℃、60% 乙醇为提取溶剂提取具有最强的α-糖苷酶抑制能力。泡茶时,开水冲泡,沙棘叶整茶具有较强的α-糖苷酶抑制能力。
表2 为沙棘叶茶提取物成分含量与抗氧化性活性、α-糖苷酶抑制作用Pearson 相关性分析结果。
表2 沙棘叶茶提取物中成分含量与抗氧化性活性、α-糖苷酶抑制作用相关性分析
Table 2 Correlation coefficients of active ingredient content with reducing power and α-glucosidase inhibitory activity of sea buckthorn leaf tea extract
注:**表示在0.01 水平上极显著相关;*表示在0.05 水平(双侧)上显著相关。
项目总黄酮含量可溶性总多酚含量异鼠李素含量还原力EC50 值(·OH)EC50 值(DPPH·)EC50 值(NO2-)IC50 值(α-Gly)总黄酮含量1 0.933**0.930**0.940**-0.481-0.879**-0.844**-0.856**可溶性总多酚含量异鼠李素含量还原力EC50 值(·OH)EC50 值(DPPH·)EC50 值(NO2-)IC50 值(α-Gly)1 0.920**0.934**-0.377-0.909**-0.761**-0.759**1 0.881**-0.202-0.823**-0.748**-0.777**1-0.511-0.926**-0.886**-0.889**1 0.592*0.608*0.575 1 0.879**0.848**1 0.948**1
由表2 可知,还原力与总黄酮含量、可溶性总多酚含量及异鼠李素含量呈极显著正相关(P<0.01),其相关系数分别为0.940、0.934 和0.881;DPPH 自由基EC50、亚硝酸根EC50、α-糖苷酶抑制作用IC50 均与总黄酮含量、可溶性总多酚含量及异鼠李素含量呈极显著负相关(P<0.01),其相关系数在0.748 和0.909 之间;而羟基自由基EC50 与总黄酮含量、可溶性总多酚含量及异鼠李素含量均呈弱的负相关,结果表明总黄酮含量、可溶性多酚含量及异鼠李素含量均对抗氧化活性和α-糖苷酶抑制作用有显著贡献。
方差分解主成分提取分析结果见表3。
表3 方差分解主成分提取分析
Table 3 Principal components of variance decomposition
初始特征值成分1 2 3 4 5 6 7 8合计6.553 0.845 0.377 0.117 0.051 0.027 0.022 0.007方差/%81.915 10.563 4.707 1.459 0.639 0.344 0.281 0.093累积百分数/%81.915 92.478 97.185 98.644 99.283 99.627 99.907 100.000提取平方和载入合计6.553方差/%81.915累积百分数/%81.915
由表3 可知,根据主成分个数提取原则提取第一主成分(特征值>1)为主成分,其贡献率占总变量的81.915%。初始因子载荷矩阵见表4。
表4 初始因子载荷矩阵
Table 4 Initial factor load matrix
项目总黄酮含量可溶性总多酚含量异鼠李素含量还原力羟基自由基清除率DPPH 自由基清除率亚硝酸根清除率α-糖苷酶抑制率第一主成分0.979 0.933 0.897 0.983 0.586 0.955 0.922 0.919
由表4 可知,总黄酮含量、可溶性总多酚含量、异鼠李素含量、还原力、DPPH 自由基清除率、亚硝酸根清除率、α-糖苷酶抑制率在第一主成分上有较高载荷(0.897~0.983),羟基自由基清除率在第一主成分上的载荷较低为0.586,所以提取一个主成分可以基本反映全部指标信息。根据主成分综合模型对提取方法进行综合评价比较,评分结果见图9。
图9 主成分分析综合评分
Fig.9 Comprehensive score of principal component analysis
由图9 可知,SBLTP-E-95、SBLTP-E-75、SBLTP-E-55、SBLT-E-95、SBLT-E-75、SBLTP-W-95 综合评分为正值,其他为负值。综合评分为正值的样品中,SBLTP-E-95 得分最高为4.859,其次SBLTP-E-75(2.700)、SBLTE-95(2.315),另外3 个样品相差不大(0.544~0.661)。60% 乙醇较水提取评分高,95 ℃提取较其他温度好,粉状比整叶提取效果更好。
沙棘叶茶的形态、提取溶剂、提取温度是影响沙棘叶茶提取物中活性成分含量及活性的重要因素。通过比较提取物中总黄酮、可溶性总多酚、异鼠李素含量、抗氧化能力和α-糖苷酶抑制活性,结合主成分分析确定沙棘叶茶粉在以60%乙醇为提取溶剂,提取温度为95 ℃时提取效果最佳。在饮茶时,将沙棘叶茶粉碎做成茶包,采用开水冲泡是最佳冲泡条件。SBLTP-E-95提取物中总黄酮含量最高,为(82.59±1.80)mg/g,可溶性总多酚含量最高,为(117.02±1.93)mg/g,异鼠李素含量最高,为(1.592±0.074)mg/g,DPPH 自由基清除的EC50 值最小为(0.141 9±0.000 6)mg/g,羟基自由基清除的EC50 值最小为(0.357 1±0.004 8)mg/g,亚硝酸根清除的EC50 值最小为(0.815 6±0.001 3)mg/g,还原力最高为(118.65±2.40)mg/g,α-糖苷酶抑制IC50 值最小为(0.393 0±0.010 1)mg/g。SBLTP-W-95 提取物在水提样品中总黄酮含量最高为(53.74±2.21)mg/g,可溶性总多酚含量最高为(95.36±0.53)mg/g,异鼠李素含量最高为(0.979±0.065)mg/g,DPPH 自由基清除的EC50 值最小为(0.175 0±0.002 6)mg/g,羟基自由基清除的EC50 值最小为(0.381 5±0.005 6)mg/g,亚硝酸根清除的EC50 值最小为(1.074 1±0.035 8)mg/g,还原力最高为(89.16±0.20)mg/g。主成分分析结果与试验结果对应,SBLTP-E-95 综合评分最高为4.859,SBLTP-W-95样品是水提样品中唯一评分结果为正值的样品。
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