沃柑是以色列研发的‘坦普尔’橘橙与‘丹西’红橘杂交的晚熟柑桔品种，其糖度达到16°Brix 以上，比目前市场上广受消费者欢迎的砂糖橘糖度（12～14°Brix）高，同时富含维生素、胡萝卜素、氨基酸等多种营养成分，并含柑橘黄酮、香豆素、柠檬苦素等特殊物质，具有美容、消疲劳、通便、降低胆固醇、降血压、扩张心脏冠状动脉等功效。沃柑成熟期集中在1～3 月份，但个别果园有可能会延长至4 月初。自2012 年，沃柑在我国开始推广种植，主要分布在广西、云南、重庆、四川、广东等冬季最低温度0 ℃以上的地区[1-2]，广西作为国内种植沃柑的重要区域之一，享有“中国沃柑看广西，广西沃柑看武鸣”的美誉。广西地处我国南部沿海地区，属亚热带季风气候，为沃柑的生长提供了得天独厚的生长条件。目前，沃柑在广西的种植面积发展约13 亿平方米，广西沃柑产业已发展成广西百亿元农业产业[3]，据统计，广西南宁武鸣区沃柑种植面积达广西沃柑种植总面积的60% 以上，同时沃柑在广西百色、柳州、桂林等地区大力推广种植，已成为广西沃柑种植业的主要构成区域[4]。
地理位置、种植环境及采收时间的不同，均会导致沃柑的品质各有差异。朱攀攀[5]研究发现温度较其他气象因子对沃柑果实品质的影响最大，南亚热带南宁和中亚热带桂林、柳州地区的株产和单位面积产量均较高，果实综合品质以高湿寡照区和干热河谷区沃柑果实综合品质最好。张耀海等[6]研究了四川、重庆、云南和广西4 个地区的沃柑果皮中挥发性成分，结果表明，柠檬烯、芳樟醇和香茅醇可作为区分重庆和四川的潜在生物标志物，醋酸辛酯和α-松油醇可作为区分广西和云南的潜在生物标志物。莫健生等[7]研究了广西桂林沃柑在2017～2018 年每年1～5 月不定期采摘的果实品质变化规律，综合比较不同采摘期的单果质量、果实纵径、横径、果皮厚度与颜色、口感风味等指标，确定桂林沃柑的适宜采收期在2 月下旬至4 月上旬。由此可见，已有研究大多集中在不同种植区、同一种植区不同采收期对沃柑品质的影响等方面，目前，关于广西不同地理位置不同采收期对沃柑品质影响的研究鲜见报道，因此，本文对广西不同产地（武鸣、全州、贵港、靖西）沃柑的色泽、理化特性及营养成分进行分析评价，以期为沃柑的产地溯源和深加工提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
沃柑：种植于武鸣、全州、贵港、靖西4 个种植基地，每间隔40 d 采摘一次，采收期与采收时间见表1；氢氧化钠（分析纯）：天津新技术产业园区科茂化学试剂有限公司；邻苯二甲酸氢钾（分析纯）：成都市科隆化学品有限公司；酚酞、碳酸钠、福林酚（均为分析纯）：国药集团化学试剂有限公司；柠檬苦素标准品、没食子酸标准品、半胱氨酸标准品等（均为色谱纯）：北京索莱宝科技有限公司。
表1 沃柑采收时间
Table 1 Harvesting schedule of orah mandarins
采收次数第1 次第2 次第3 次采收期ⅠⅡⅢ采收时间2021 年12 月6 日2022 年1 月15 日2022 年2 月24 日
1.2 仪器与设备
CR-400 色彩色差计：日本KONICA MINOLTA 公司；LC-2040C 超高效液相色谱仪：日本岛津公司；L550台式低速大容量离心机：湘仪离心机仪器有限公司；DW/BD-55W152EU1 低温冷冻转换柜：青岛海尔特种电冰柜有限公司；XM-1000UVF 智能静音超声波清洗器：小美超声仪器（昆山）有限公司。
1.3 试验方法
1.3.1 色泽的检测
采用色彩色差计测定沃柑果皮的色泽，每组样品平行测定5 次。L*值表示样品的亮度，L*值=0 为黑色，L*值=100 为白色；a*值表示样品的红绿度，a*值小于0 为绿色，a*值大于0 为红色；b*值表示样品的黄蓝度，b*值小于0 为蓝色，b*大于0 为黄色。
1.3.2 可溶性固形物含量、可滴定酸含量、固酸比的测定
可溶性固形物含量、可滴定酸含量分别按照GB/T 8210—2011《柑桔鲜果检验方法》中阿贝折射仪法、指示剂法进行测定；固酸比按照GB/T 12947—2008《鲜柑橘》中的方法计算。
1.3.3 维生素C 含量的测定
维生素C 含量按照GB 5009.86—2016《食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定》中荧光法进行测定。
1.3.4 类胡萝卜素含量的测定
类胡萝卜素含量参照迟淼[8]的石油醚-丙酮萃取法测定。
1.3.5 柠檬苦素含量的测定
柠檬苦素含量参照任二芳等[9]的方法测定。
1.3.6 氨基酸含量的测定
氨基酸含量参照Lee 等[10]的比色法测定。
1.3.7 总酚含量的测定
总酚含量参考马倩[11]研究中的福林酚法测定。
1.4 数据处理
数据使用OriginPro 2016 绘图及聚类分析，采用SPSS 22.0 软件进行数据差异性显著分析。
2 结果与分析
2.1 不同产地沃柑果皮色泽变化分析
不同产地不同采收期的沃柑果皮色泽变化见表2。
表2 不同产地不同采收期沃柑果皮色泽变化
Table 2 Color changes of orah mandarins from different producing areas at different harvting periods
注：同列不同小写字母表示差异显著（P＜0.05）。
b*值72.25±0.71b 67.00±0.65d 63.18±0.78e 71.57±0.64bc 70.81±0.44bc 64.81±0.58e 72.22±0.63bc 71.25±0.72bc 64.11±2.62e 74.41±0.34a 67.99±0.38d 70.39±0.92c产地武鸣采收期全州贵港靖西ⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢL*值66.83±0.75b 62.53±0.71d 58.00±0.60f 66.88±0.27b 64.19±0.11c 60.82±0.17e 67.35±1.10b 64.54±0.26c 60.71±1.62e 70.86±0.31a 65.01±0.21c 62.72±0.87d a*值20.43±1.17h 36.06±0.64c 40.15±0.37a 20.80±0.57h 26.74±0.27f 37.90±0.76b 27.84±1.13f 30.48±0.67e 36.86±1.10bc 24.10±1.10g 32.73±1.09d 33.63±0.77d
由表2 可以看出，4 个产地沃柑果皮的L*值和b*值随着采收期延长总体呈现降低趋势，a*值呈升高的趋势。L*值下降是果皮类胡萝卜素的不断积累所导致[12]，a*值升高与孙莹等[13]研究结果相同。沃柑果皮色泽变化具体表现为全州、贵港采收期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的沃柑L*值之间均无显著差异（P＞0.05），且显著低于靖西沃柑L*值（P＜0.05），采收期Ⅲ武鸣沃柑L*值最小，为58.00；采收期Ⅰ、Ⅲ武鸣、全州、贵港的沃柑b*值均无显著差异（P＞0.05），且显著低于靖西沃柑b*值（P＜0.05），采收期Ⅰ靖西沃柑b*值最大，为74.41；采收期Ⅱ全州、贵港的沃柑b*值显著高于武鸣、靖西（P＜0.05）；采收期Ⅱ、Ⅲ武鸣沃柑的a*值显著高于其他3 个产地（P＜0.05），其中采收期Ⅲ武鸣沃柑的a*值最大为40.15。不同采收期、不同产地柑橘果实色泽出现明显差异，可能是果实果皮中总类胡萝卜素及各个组分种类和含量的不同所引起的[14]。
2.2 不同产地沃柑理化特性分析
不同产地、不同采收期沃柑的理化特性分析见表3。
表3 不同产地不同采收期沃柑理化特性分析
Table 3 Analysis of physicochemical properties of orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
注：同列不同小写字母表示差异显著（P＜0.05）。
产地武鸣采收期固酸比18.30±0.17h 24.54±0.16e 30.22±0.58b 12.00±0.08j 18.24±0.11h 22.88±0.08f 17.41±0.00i 22.61±0.28f 25.14±0.36d 21.83±0.00g 26.92±0.00c 31.11±0.00a全州贵港靖西ⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢⅠⅡⅢ可滴定酸含量/（g/100 mL）0.61±0.01f 0.54±0.01g 0.46±0.01i 0.92±0.01a 0.84±0.01b 0.69±0.00e 0.81±0.00c 0.74±0.00d 0.73±0.01d 0.60±0.00f 0.52±0.00h 0.45±0.00j可溶性固形物含量/%11.10±0.00h 13.33±0.06f 14.00±0.09e 11.00±0.00h 15.27±0.03d 15.78±0.06c 14.10±0.00e 16.73±0.21b 18.43±0.06a 13.10±0.00g 14.00±0.00e 14.00±0.00e
由表3 可知，随着采收期的延长，4 个产地沃柑的可滴定酸含量均逐渐下降，而可溶性固形物含量和固酸比呈上升趋势，可能是随着果实成熟度增加，果实的可溶性糖增多[7]。3 个采收期中武鸣、靖西的沃柑可滴定酸含量均显著（P＜0.05）低于全州、贵港，采收期Ⅲ武鸣、靖西沃柑可滴定酸含量分别为0.46、0.45 g/100 mL，贵港沃柑可溶性固形物含量显著（P＜0.05）高于其他3 个产地沃柑，变化范围为14.10%～18.43%。不同采收期靖西、武鸣沃柑固酸比均显著（P＜0.05）高于全州、贵港的沃柑，其中靖西沃柑固酸比最高，为21.83～31.11，全州沃柑固酸比最低，为12.00～22.88。固酸比是形成果品营养价值和风味特点的重要物质基础，固酸比越高，果味越甜，反之越酸，因此，固酸比可作为果实品质或成熟度的参考指标之一，如美国加州规定甜橙果汁的固酸比达8∶1 时即达到成熟[15]。同时固酸比也是评价果实合理采摘的重要指标[9]，广西壮族自治区地方标准DB 45/T 2272—2021《沃柑采收及保鲜贮运技术规程》中也明确了沃柑采摘的成熟度指标：可溶性固形物含量≥13.0 g/100 g，总酸≤0.5 g/100 g，即固酸比≥26，由此可见，武鸣、靖西采收期Ⅲ沃柑符合采摘成熟度要求。
2.3 不同产地沃柑营养成分分析
图1～图5 分别为不同产地不同采收期沃柑的维生素C、总酚、氨基酸、类胡萝卜素、柠檬苦素的含量变化情况。
图1 不同产地不同采收期沃柑维生素C 含量变化
Fig.1 Change of vitamin C content in orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
由图1 可知，4 个产地不同采收期沃柑维生素C 含量呈升高趋势，与杨阳等[15]研究的5 个品种的晚熟柑橘果实成熟过程中维生素C 含量变化趋势一致。武鸣、全州、贵港、靖西不同采收期沃柑中维生素C 含量分别为35.74～37.53、43.39～48.06、39.23～45.30、37.20～40.79 mg/100 mL，其中全州沃柑维生素C 含量最高，其次为贵港沃柑。由图2 可以看出，4 个产地不同采收期沃柑的总酚含量呈下降趋势，这与朱晓艳[16]研究不同发育时期瓯柑果实中的总酚含量变化情况一致。其可能是随着水果成熟度提高，果实中缺乏酚类化合物生物合成所必需的底物[17]。不同采收期全州沃柑的总酚含量为50.46～76.22 μg/mL，均高于其他3 个产地，其中贵港采收期Ⅲ沃柑总酚含量最低，为43.84 μg/mL。由图3 可知，氨基酸含量呈现动态变化趋势，靖西采收期Ⅰ沃柑氨基酸含量最高为585.71 μmol/mL，靖西采收期Ⅱ沃柑氨基酸含量最低为262.34 μmol/mL，这与任二芳等[9]研究不同采收成熟度沃柑汁的氨基酸含量变化情况一致。水果氨基酸含量与组成不仅影响果实品质、营养价值和保健价值，对果实风味还有一定影响，这是由于氨基酸有一定的味感[18-20]。由图4 可以看出，随着果实采收期的延长，沃柑类胡萝卜素含量逐渐增加，这与汤雨晴等[21]研究朱红橘果实成熟过程中类胡萝卜素含量变化情况相似。3 个采收期的靖西沃柑的类胡萝卜素含量均高于其他产地沃柑，全州采收期Ⅰ沃柑类胡萝卜素含量最低，为5.85 μg/mL，靖西采收期Ⅲ沃柑类胡萝卜素含量最高，为11.55 μg/mL。不同组分和含量的类胡萝卜素不仅可以使柑橘的色泽不同[22-24]，同时也赋予柑橘具有一定的功效。由图5 可知，4 个产地沃柑柠檬苦素含量随着果实成熟度增加呈降低的趋势，与李一兵[25]的研究结果一致。采收期Ⅰ～Ⅲ全州沃柑的柠檬苦素含量为1.45～7.17 μg/g，均高于其他产地，采收期Ⅲ贵港沃柑的柠檬苦素含量最低，为0.47 μg/g。柠檬苦素在水溶液中苦味阈值为1.0 mg/L，果汁中苦味阈值3.4 mg/L[26]，人感受的柠檬苦素阈值为6 mg/L[25]，全州采收期Ⅲ的沃柑、贵港采收期Ⅱ、Ⅲ的沃柑及武鸣、靖西采收期Ⅰ-Ⅲ的沃柑柠檬苦素含量均低于果汁及人感受的柠檬苦素阈值。
图2 不同产地不同采收期沃柑总酚含量变化
Fig.2 Change of total phenol content in orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
图3 不同产地不同采收期沃柑氨基酸含量变化
Fig.3 Change of amino acid content in orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
图4 不同产地不同采收期沃柑类胡萝卜素含量变化
Fig.4 Change of carotenoid content in orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
图5 不同产地不同采收期沃柑柠檬苦素含量变化
Fig.5 Change of limonin content in orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
2.4 不同产地沃柑品质的聚类分析
4 个产地3 个采收期沃柑采用组平均法进行系统聚类分析，聚类区间为平方欧式距离，聚类分析结果见图6，聚类群的品质分析见表4。
图6 不同产地不同采收期沃柑品质聚类分析
Fig.6 Cluster analysis of quality of orah mandarins from different producing areas at different harvesting periods
W、Q、G、J 分别为武鸣、全州、贵港、靖西；Ⅰ～Ⅲ分别为采收期Ⅰ～Ⅲ。
表4 3 个聚类群的品质分析
Table 4 Quality analysis of three cluster groups
样品L*值a*值b*值固酸比武鸣、全州、贵港、靖西采收期Ⅰ沃柑全州、贵港采收期Ⅱ、Ⅲ及武鸣、靖西采收期Ⅱ沃柑武鸣、靖西采收期Ⅲ沃柑67.98 23.29 72.61可滴定酸含量/（g/100 mL）0.74可溶性固形物含量%12.33 17.39维生素C含量/（mg/100 mL）38.89总酚含量/（μg/mL）71.84氨基酸含量/（μmol/mL）537.66类胡萝卜素含量/（μg/mL）8.30柠檬苦素含量/（μg/g）4.03 62.97 33.46 67.66 0.68 15.59 23.39 42.38 52.10 284.20 9.90 2.15 60.36 36.89 66.79 0.46 14.00 30.67 39.16 47.83 379.60 10.62 0.82
结合图6 和表4 可知，武鸣、全州、贵港、靖西采收期Ⅰ的沃柑归为一类，此类群沃柑色泽更亮黄（L*值、b*值最大），固酸比、维生素C 及类胡萝卜素含量最低，总酚、氨基酸及柠檬苦素含量最高；全州、贵港采收期Ⅱ、Ⅲ及武鸣、靖西采收期Ⅱ的沃柑归为一类，此类群沃柑呈橘黄色（a*值、b*值较大），维生素C 含量最高，氨基酸含量最低，固酸比、总酚、类胡萝卜素及柠檬苦素含量居中；武鸣、靖西采收期Ⅲ的沃柑归为一类，此类群沃柑色泽偏红（a*值最大），固酸比、类胡萝卜素含量最高，总酚、柠檬苦素含量最低，维生素C 及氨基酸含量居中。
3 结论
本试验对4 个产地（武鸣、全州、贵港、靖西）3 个采收期的沃柑色泽、理化特性及营养成分分别进行评价与分析。结果表明：产地、采收期均影响沃柑的品质。1）色泽方面：随着采收期延长4 个产地的沃柑果皮的L*值和b*值逐渐降低，a*值不断升高；2）理化特性方面：随着采收期延长，4 个产地沃柑可滴定酸含量均逐渐下降，可溶性固形物含量和固酸比逐渐增加，武鸣、靖西采收期Ⅲ沃柑符合DB 45/T 2272—2021《沃柑采收及保鲜贮运技术规程》中采摘成熟度要求；3）营养成分方面：4 个产地沃柑随着采收期延长，其维生素C、类胡萝卜素含量逐渐升高，总酚、柠檬苦素含量整体呈下降变化，氨基酸含量呈现动态变化趋势，全州采收期Ⅲ沃柑维生素C 含量最高，靖西采收期Ⅲ沃柑类胡萝卜素含量最高，贵港采收期Ⅲ沃柑总酚、柠檬苦素含量最低，靖西采收期Ⅰ沃柑氨基酸含量最高，靖西采收期Ⅱ沃柑氨基酸含量最低。聚类分析显示武鸣、全州、贵港、靖西的沃柑在采收期Ⅰ时品质相似，在采收期Ⅱ、Ⅲ时，全州、贵港的沃柑相似，而武鸣、靖西的沃柑采收期Ⅱ时的品质差异较小，武鸣、靖西的沃柑在采收期Ⅲ时品质较为一致。通过综合比较，发现采收期Ⅰ、Ⅱ的武鸣、全州、贵港、靖西沃柑品质无差异，采收期Ⅲ的武鸣、靖西沃柑品质优于全州、贵港沃柑，采收期Ⅲ的武鸣、靖西沃柑果实色泽诱人、酸甜可口无苦涩味、营养丰富，较适合鲜食和加工。
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