软枣猕猴桃[Actinidia arguta(Sieb.& Zucc)Planch.ex Miq.]别名软枣子、奇异莓、猕猴梨等,属于猕猴桃科(Actinidiaceae Gilg&Werderm.)、猕猴桃属(Actinidia Lindl.)大型落叶藤本植物[1]。其果实既可以鲜食也可以作药用,鲜食时风味独特、果味鲜美且含有丰富的维生素C、蛋白质、氨基酸及微量元素等营养物质[2-3],药用则具有养身保健、解热等功效[4],随着对软枣猕猴桃研究工作的进展,其活性成分也被不断挖掘,果实内主要包含的活性成分有多糖类、多酚类、生物碱类、挥发油类及原花青素类等[5],具有抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、抗衰老、降血糖、抗炎、抑制失眠、提高免疫力、润肠通便等作用[6-9]。这些活性成分具有的功能和作用使软枣猕猴桃在功能性产品的研究、开发和应用中具有良好的前景。但是,不同资源软枣猕猴桃果实间生物活性成分含量存在差异,其抗氧化能力也各不相同。
果实的抗氧化能力不仅与功能性产品的开发有关还与耐贮藏性存在一定的关系。因此,国内外对于软枣猕猴桃抗氧化性能方面的研究也日渐增多,有研究表明软枣猕猴桃的抗氧化活性显著高于同属的美味猕猴桃[10];同时也有研究表明当软枣猕猴桃多糖浓度为0.4% 时,对羟自由基的清除率可达到39%[5];An 等[11]对3 个软枣猕猴桃品种进行总多酚和总黄酮的提取,并通过DPPH 自由基清除法、ABTS+自由基清除法和氧自由基吸收能力法对其抗氧化能力进行评价,表明每100 g 鲜果的抗氧化能力相当于203.4、135.5、115.0 mg 的维生素C。但目前针对于软枣猕猴桃资源的抗氧化活性的研究较少。本文以32 份软枣猕猴桃资源为材料,测定和比较果实的总酚、总黄酮、维生素C、花青素含量与抗氧化活性,旨在筛选出抗氧化性强的优质软枣猕猴桃资源,为培育强抗氧化性、耐贮藏品种与开发功能性产品提供理论依据。
32 份软枣猕猴桃均于2022 年9 月采自中国农业科学院特产研究所软枣猕猴桃资源圃,采摘后于-80 ℃超低温保存备用,其种质资源及来源见表1。
表1 32 份软枣猕猴桃资源及来源
Table 1 Resources and sources of 32 fruits of A.arguta
编号S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11资源A020203 A040103 A060902 A100101 A100703 A100801 A101201 A111001 A120403 A120601 A130101来源吉林省抚松县吉林省集安县吉林省左家镇吉林省集安县吉林省集安县吉林省集安县吉林省敦化市吉林省左家镇吉林省敦化市吉林省敦化市吉林省集安县编号S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 S21 S22资源A130602 A130701 A130801 A140101 A140301 A140602 A160701 A170303 A180303 A180902 A191002来源吉林省集安县吉林省集安县吉林省集安县吉林省左家镇吉林省左家镇吉林省敦化市吉林省左家镇吉林省抚松县吉林省抚松县吉林省左家镇吉林省集安县编号S23 S24 S25 S26 S27 S28 S29 S30 S31 S32资源B020802 B070101 B080401 B080701 T040501 T060203 T060301 T060503魁绿苹绿来源吉林省左家镇吉林省左家镇吉林省集安县吉林省集安县吉林省抚松县吉林省集安县吉林省抚松县吉林省集安县吉林省集安县吉林省集安县
无水乙醇、氢氧化钠、95% 乙醇、甲醇、30% 过氧化氢、硫酸亚铁、无水乙酸钠、碳酸钠、磷酸二氢钠、十二水合磷酸氢二钠(均为分析纯):北京化工厂;三水合乙酸钠、冰乙酸、三氯化铁、硝酸铝、氯化钾(均为分析纯):中国医药集团有限公司;盐酸(分析纯):天津市耀华化学试剂有限责任公司;没食子酸标准品:天津市华东试剂厂;邻苯三酚(分析纯):安徽泽升科技有限公司;甲酸(分析纯):天津市光复精细化工研究所;过硫酸钾(分析纯):天津市北联精细化学品开发有限公司;福林酚试剂、亚硝酸钠、水杨酸、三羟甲基氨基甲烷(traffic and road information system,Tris)、铁氰化钾、三氯乙酸(均为分析纯)、芦丁标准品:生工生物工程(上海)股份有限公司;2,4,6-三吡啶基三嗪(2,4,6-three pyridyl three triazine,TPTZ)、2,2-联苯基-1-苦基肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)(均为分析纯):美国sigma 公司。
ML104/02 型电子天平:梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;FA1004B 型电子天平:上海越平科学仪器有限公司;CJJ-931 型二连磁力加热搅拌器、FSH-2高速匀浆机:江苏金坛金城国胜实验仪器厂;HWS-12型电热恒温水浴锅、KQ-300E 型超声波清洗器:北京长流科学仪器有限公司;IMark 酶标仪:美国Biorad 公司;Allegra 64R 型高速冷冻离心机:广州深华生物技术有限公司;702 型-80 ℃超低温冰箱:北京诚茂兴业科技发展有限公司。
1.3.1 软枣猕猴桃提取物制备
参照文献[12]的方法,采用匀浆机将软枣猕猴桃样品打成浆状后,准确称取果浆2 g,加入含0.1%甲酸的甲醇溶液8 mL,于室温下超声波辅助提取10 min,然后利用高速冷冻离心机分离离心(4 ℃,9 000 r/min),取上清液,重复提取2 次后合并上清液,置于-4 ℃保存。
1.3.2 总酚含量测定
参照文献[13]的方法,采用福林酚试剂比色法测定总酚含量。以没食子酸为标准品,分别取1 mL 系列浓度的没食子酸标准品加入到25 mL 容量瓶中,加入6 mL 去离子水、1 mL 1.0 mol/L 的福林酚试剂,摇匀,放置6 min,再各加入4 mL 10.6% 的碳酸钠溶液,摇匀,室温静置60 min,用去离子水稀释至刻度线,摇匀后于760 nm 处测定吸光度,并绘制标准曲线。
样品测定按照标准曲线方法进行,总酚含量(F,mg/g)计算公式如下。
式中:C 为样品中总酚的浓度,μg/mL;C0 为空白中总酚的浓度,μg/mL;m 为称取样品的质量,g;V 为提取液的体积,mL;f 为稀释倍数。
1.3.3 总黄酮含量测定
参照文献[14]的方法,采用硝酸铝比色法测定总黄酮含量。以芦丁为标准品,分别取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL 的芦丁标准品加入到10 mL 容量瓶中,依次分别加入0.5 mL 5%亚硝酸钠,摇匀,放置6 min,加入0.5 mL 10% 硝酸铝,摇匀,放置6 min,加入5 mL 4%氢氧化钠,最后用60%乙醇溶液定容至刻度线,摇匀,放置15 min 后于509 nm 处测定吸光度,并绘制标准曲线。样品测定按照标准曲线方法进行,总黄酮含量(T,mg/g)计算公式如下。
式中:C 为根据标准曲线查得的黄酮含量,mg;V为样品提取液的总体积,mL;m 称取样品的质量,g;V0为测定吸取的提取液体积,mL。
1.3.4 维生素C 含量测定
参照文献[15]的方法,采用2,6-二氯靛酚滴定法测定维生素C 含量。取10 g 果实匀浆,用草酸溶液移至100 mL 容量瓶中,并稀释定容至刻度线,摇匀后过滤。准确吸取10 mL 滤液于50 mL 锥形瓶中,用标定过的2,6-二氯靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色15 s不褪色为止。用10 mL 草酸溶液作空白。样品中维生素C 含量(W,mg/100 g)计算公式如下。
式中:V 为滴定样品所消耗的2,6-二氯靛酚溶液体积,mL;V0 为滴定空白所消耗的2,6-二氯靛酚溶液体积,mL;T 为2,6-二氯靛酚溶液的滴定度,即每毫升2,6-二氯靛酚溶液相当于抗环血酸的毫克数,mg/mL;A 为稀释倍数;m 为称取样品质量,g。
1.3.5 花青素含量测定
参照文献[16]的方法进行花青素含量测定。取果浆1 g,加入10 mL 0.1 mol/L 的盐酸甲醇溶液,在32 ℃暗中振荡提取4 h 至材料完全变白,以0.1 mol/L 盐酸甲醇溶液作为参比液,在530、620、650 nm 处测定吸光度,记为A530、A620 和A650。样品中花青素含量(H,nmol/g)计算公式如下。
式中:Aλ 为花青素在530 nm 下的吸光度;ελ 为花青素摩尔消光系数,4.26×104;V 为提取液的总体积,mL;W 为称取样品的质量,g;106 为计算结果换算成nmol 的倍数。
1.3.6 抗氧化活性测定
1.3.6.1 DPPH 自由基清除能力测定
参照张文娟[17]的方法,取各样品提取液0.2 mL,依次加入2.8 mL DPPH 溶液,室温避光反应30 min 后于517 nm 处测定吸光度。空白为0.2 mL 的80%甲醇溶液。DPPH 自由基清除率(D,%)计算公式如下。
式中:A1 为样品的吸光度;A2 为空白的吸光度。
1.3.6.2 羟基自由基清除能力测定
参照纪旭光[18]的方法,取各样品提取液1 mL,分别依次加入1 mL 10 mmol/L 的FeSO4 溶液、1 mL 10 mmol 水杨酸-乙醇溶液,最后加入1 mL 8.8 mol/L 的H2O2 溶液,37 ℃反应30 min 后于510 nm 处测定吸光度。空白为1 mL 的蒸馏水。羟基自由基清除率(Q,%)计算公式如下。
式中:A1 为样品的吸光度;A2 为空白的吸光度。
1.3.6.3 超氧阴离子自由基清除能力测定
参照陈芮蝶[19]的方法,取各样品提取液1 mL,分别依次加入4.5 mL 50 mmol/L pH8.2 的Tris-HCl 缓冲液,摇匀,于25 ℃恒温水浴锅中保温20 min,取出后立即加入0.3 mL 25 mmol/L 的邻苯三酚溶液,迅速摇匀后于25 ℃恒温水浴反应5 min,最后加入1 mL 8 mmol/L的HCl 终止反应,于320 nm 处测定吸光度。空白为1 mL 的蒸馏水。超氧阴离子自由基清除率(Y,%)计算公式如下。
式中:A1为样品的吸光度;A2为空白的吸光度。
1.3.6.4 总抗氧化能力测定
参照谢敏[20]的方法,将300 mmol/L 的醋酸钠溶液、10 mmol/L 的TPTZ 溶液(溶剂为40 mmol/L 的盐酸溶液)和20 mmol/L 的FeCl3·6H2O 按照10∶1∶1 的体积比混合配制为工作液,使用前在37 ℃水浴避光保温备用。分别取0.1 mmol/mL 的FeSO4 溶液0、1、2、4、6、8、10 mL 定容到100 mL 容量瓶,得到0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mmol/L 的FeSO4 标准液,取100 mL 标准液,依次加入3 mL 工作液、0.3 mL 蒸馏水,混匀准确反应5 min 后于593 nm 处测定吸光度,绘制标准曲线。样品测定按照标准曲线方法进行。
1.3.6.5 总还原力测定
参照陈佳等[21]的方法,取各样品提取液2.5 mL,依次加入2.5 mL pH6.6 的0.2 mol/L 磷酸缓冲液,2.5 mL 1%铁氰化钾溶液,50 ℃水浴20 min 后迅速冷却,加入2.5 mL 10%三氯乙酸溶液,于3 000 r/min 离心10 min,取5 mL 上清液,加入4 mL 蒸馏水及1 mL 0.1% 三氯化铁溶液,混匀反应10 min 后于700 nm 处测定吸光度。吸光度越大,说明还原能力越强。
用Excel 2010 软件对数据进行统计整理,SPSS 23.0 对数据进行统计学分析。
不同软枣猕猴桃资源果实中总酚含量如图1所示。
图1 不同软枣猕猴桃资源果实中总酚含量
Fig.1 Total phenol content in fruits of A.arguta from different resources
不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
由图1 可知,软枣猕猴桃资源果实中总酚含量存在差异,变化范围为0.75~2.26 mg/g。B020802 中总酚的含量最高,为2.26 mg/g,A130701、A160701 和A180902 次之,分别为2.05、2.06、2.06 mg/g,B020802与这3 份资源之间差异显著。总酚含量最低的软枣猕猴桃资源种类是苹绿,含量为0.75 mg/g。
不同软枣猕猴桃资源果实总黄酮含量如图2 所示。
图2 不同软枣猕猴桃资源果实中总黄酮含量
Fig.2 Total flavonoid content in fruits of A.arguta from different resources
不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
由图2 可知,不同软枣猕猴桃资源果实中总黄酮含量存在差异,变化范围为1.07~2.99 mg/g。B020802中总黄酮的含量最高,为2.99 mg/g,A160701 和苹绿次之,分别为2.78 mg/g 和2.71 mg/g,B020802 与这两份资源间差异显著。总黄酮含量较低的软枣猕猴桃资源种类是魁绿,含量为1.07 mg/g。
不同软枣猕猴桃资源果实维生素C 含量如图3 所示。
图3 不同份软枣猕猴桃资源果实中维生素C 含量
Fig.3 Vitamin C content in fruits of A.arguta from different resources
不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
由图3 可知,不同软枣猕猴桃资源果实中维生素C 含量存在差异,变化范围为15.27~201.70 mg/100 g。魁绿中维生素C 含量最高,为201.70 mg/100 g,A100703 和B080401 次之,分别为102.61 mg/100 g 和101.92 mg/100 g,魁绿与这两份资源之间差异显著。维生素C 含量较低的资源为A101201 和A140301,分别为15.74 mg/100 g 和15.27 mg/100 g。
不同软枣猕猴桃资源果实花青素含量如图4所示。
图4 不同软枣猕猴桃资源果实中花青素含量
Fig.4 Anthocyanin content in fruits of A.arguta from different resources
不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
由图4 可知,不同软枣猕猴桃资源果实中含有的花青素含量存在差异,变化范围为0.57~5.00 nmol/g。T060301 中花青素含量最高,为5.00 nmol/g,A170303次之,为4.79 nmol/g,且两者间差异显著。花青素含量最低的软枣猕猴桃资源为A130801,为0.57 nmol/g。
2.5.1 5 种方法测定软枣猕猴桃果实的抗氧化活性
测定软枣猕猴桃资源果实提取液对DPPH 自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除率、总抗氧化能力及总还原力,研究不同软枣猕猴桃资源的抗氧化能力,结果如表2 所示。
表2 不同软枣猕猴桃资源果实抗氧化能力
Table 2 Antioxidant capacity of fruits of A.arguta from different resources
注:同列不同小写字母表示差异显著,P<0.05。
样品总抗氧化能力总还原力排序S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19 S20 S21 S22 S23 S24 S25 S26 S27 S28 S29 S30 S31 S32 DPPH 自由基清除率/%36.79r 49.63m 50.55lm 62.51h 68.30e 42.78p 38.59q 48.08n 61.89h 69.02e 43.25p 48.20n 59.62i 35.26s 66.83f 62.65h 51.37l 80.91b 38.02q 62.67h 75.60c 54.73j 80.20b 60.49i 72.39d 64.42g 52.60k 51.27l 62.51h 53.11k 86.00a 45.19o羟基自由基清除率/%73.61hijkl 76.14defg 77.61bcde 72.46klm 73.50ijkl 72.60jklm 73.57hijkl 77.61bcde 70.39mn 70.35mn 76.00defgh 64.40o 59.54p 79.62ab 75.47efghi 73.75ghijkl 69.48n 70.70mn 78.06bcd 71.69lmn 74.97fghij 78.24abcd 74.21ghijk 76.76bcdef 78.19bcd 76.12defg 74.04ghijkl 70.26mn 69.62n 78.73abc 80.57a 79.84ab超氧阴离子自由基清除率/%60.75kl 63.43j 71.16g 79.82b 77.93c 59.89l 61.67k 70.75g 65.39i 76.29d 72.33f 54.33p 56.49n 70.75g 59.89l 58.05m 54.53p 55.01op 63.32j 64.79i 80.42b 61.37k 55.56o 65.10i 81.94a 78.45c 75.27e 62.81j 69.17h 53.35q 72.44f 74.93e 4.04m 4.94i 5.09h 6.20d 7.03c 4.35k 3.55p 3.97m 5.75f 6.04e 3.85n 3.99m 5.05h 2.85q 6.08e 5.16h 4.43k 7.63b 3.66o 5.36g 6.12de 4.53j 7.85a 5.07h 5.81f 5.29g 4.33kl 4.23l 4.94i 4.94i 5.31g 2.71r 1.60p 1.39q 1.98l 2.75ef 2.92b 1.66op 1.65op 1.84n 2.83cd 2.88bc 1.90mn 1.92m 2.72f 1.69o 2.22j 1.86mn 1.89mn 2.89bc 1.84n 2.81de 2.87bc 2.07k 2.98a 2.45gh 2.79de 2.50g 2.29i 2.40h 2.41h 2.34i 1.62p 1.25r抗氧化综合评价值Yi 1.42 1.95 2.67 3.63 3.98 1.56 1.41 2.31 2.96 3.57 2.20 1.15 1.89 1.85 2.83 2.21 1.54 3.39 1.81 2.93 4.08 2.38 3.66 2.88 4.11 3.46 2.71 2.12 2.68 2.33 3.39 1.92 30 23 16 5 3 28 31 19 10 6 21 32 25 26 13 20 29 8 27 11 2 17 4 12 1 7 14 22 15 18 9 24
由表2 可知,不同资源的软枣猕猴桃果实对DPPH 自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除率、总抗氧化能力及总还原力都各不相同。DPPH 自由基清除率的范围为35.26%~86.00%,其中魁绿对DPPH 自由基的清除率最强,显著高于其他资源,A130801 对DPPH 自由基的清除率最低。羟基自由基清除率的范围为59.54%~80.57%,其中魁绿、苹绿、A130801 对羟基自由基的清除率较高,三者之间差异不显著,A130701 对羟基自由基的清除能力最弱。超氧阴离子自由基清除率范围为53.35%~81.94%,其中对超氧阴离子自由基清除能力最强的是B080401,与其他软枣猕猴桃资源相比差异显著;T060503 对超氧阴离子自由基清除率最低。总抗氧化能力为2.71~7.85,总还原力的范围为1.25~2.98。B020802 对DPPH 自由基清除率、总抗氧化能力和总还原力都较高,对于羟自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率则处于中等或较低水平。A130801 对DPPH 清除率和总抗氧化能力都较低,而对羟基自由基清除率较高。苹绿的总抗氧化能力和总还原力都最低,而对羟自由基清除率处于较高水平。
2.5.2 软枣猕猴桃资源果实总抗氧化能力的加权综合评价
当选用不同的抗氧化评价方法测定不同软枣猕猴桃资源的抗氧化能力时,由于不同评价方法的反应机制不同,同一种软枣猕猴桃资源果实在不同的抗氧化评价体系中所表现出来的抗氧化能力各不相同,例如魁绿对DPPH 自由基清除率和羟自由基清除率都最高,而对超氧阴离子清除率、总抗氧化能力、总还原力则处于中等水平。因此,本研究运用加权综合评分法建立多因素综合评价数学模型[22],对不同软枣猕猴桃资源果实的抗氧化能力进行系统综合评价。
根据极值标准化公式Yij=(Xij-Xijmin)/(Xijmax-Xijmin),将原始性状指标值无量纲化置闭区间[0,1]上。其中,Xij 为第i 种资源,第j 种抗氧化评价方法的指标值,Xijmax、Xijmin 分别为第i 种资源,第j 种抗氧化评价方法指标值的最大值和最小值。抗氧化综合评价值Yi=∑Yij(i=1、2、3…20,j=1,2,3)。由表2 可知,软枣猕猴桃资源果实抗氧化综合评价值的变化范围为1.15~4.11,排名前5 位的软枣猕猴桃资源种类依次为B080401、A180902、A100703、B020802、A100101,抗氧化综合评价值排名靠后的是A020203、A101201、A130602。分析原因可能是不同软枣猕猴桃资源所包含的功能性成分多酚和黄酮的种类与含量不同,维生素C 含量也各有差异。
对软枣猕猴桃资源果实总酚、总黄酮、维生素C、花青素含量、抗氧化活性和抗氧化综合评价值进行相关性分析,结果见表3。
表3 软枣猕猴桃资源果实总酚、总黄酮、维生素C、花青素含量和抗氧化能力的相关系数
Table 3 Correlation coefficients of contents of total phenols,total flavonoids,vitamin C,anthocyanins,and antioxidant capacity in fruits of A.arguta from different resources
注:**表示在0.01 水平上极显著相关;*表示在0.05 水平上显著相关。
项目总黄酮含量维生素C 含量花青素含量DPPH 自由基清除率羟基自由基清除率超氧阴离子自由基清除率总抗氧化能力总还原力抗氧化综合评价值总酚含量0.322**0.136-0.151 0.582**-0.402**-0.081 0.765**0.656**0.491**总黄酮含量维生素C含量花青素含量DPPH 自由基清除率羟基自由基清除率超氧阴离子自由基清除率总抗氧化能力总还原力-0.314**0.308**0.263**-0.237*-0.335**0.427**0.284**0.12-0.072 0.611**0.138 0.626**0.330**0.351**0.666**0.119-0.024-0.087 0.102 0.102 0.064-0.071 0.183 0.854**0.673**0.832**0.359**-0.183-0.359**0.189 0.037 0.179 0.584**0.781**0.784**0.748**
由表3 可知,总酚含量、总黄酮含量和维生素C含量都与DPPH 自由基清除率、总抗氧化能力和总还原力呈极显著正相关;总黄酮、维生素C 含量与超氧阴离子自由基清除率呈极显著相关;总黄酮与羟基自由基清除率呈显著负相关,这一结果说明总酚、总黄酮与维生素C 含量对软枣猕猴桃的抗氧化活性有影响。而总酚含量、维生素C 含量与抗氧化综合评价值呈极显著正相关,相关系数分别为0.491 和0.666,更能说明相比于总黄酮,总酚与维生素C 含量更能影响软枣猕猴桃的抗氧化能力,且维生素C 含量的影响力更大。花青素含量与抗氧化项目相关性不显著,说明其含量对抗氧化能力不存在影响。DPPH 自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、总抗氧化能力和总还原力与抗氧化综合评价值呈极显著正相关,说明这4 种测定方法适用于软枣猕猴桃抗氧化活性测定。
对软枣猕猴桃资源果实总酚、总黄酮、维生素C、花青素含量、抗氧化活性进行主成分分析,结果见表4。
表4 旋转后因子载荷矩阵及贡献率
Table 4 Factor loading matrix and contribution rate after rotation
项目总酚含量总黄酮含量维生素C 含量花青素含量DPPH 自由基清除率羟基自由基清除率超氧阴离子自由基清除率总抗氧化能力总还原力贡献率/%累计方差贡献率/%主成分F1 0.851 0.381 0.425 0.004 0.857-0.388 0.087 0.931 0.875 39.719 39.719 F2-0.245-0.502 0.789-0.004 0.300 0.606 0.843 0.023 0.050 23.339 63.118 F3-0.202 0.550-0.132 0.900 0.180 0.199-0.102 0.170 0.057 14.273 77.391
由表4 可知,根据特征值大于1 的原则共提取了3 个主成分,累计方差贡献率达到77.391%。第一主成分的贡献率为39.719%,影响该主成分的主要特征向量为总抗氧化能力、总还原力、DPPH 自由基清除率与总酚含量,分别为0.931、0.875、0.857 与0.851。第二主成分的贡献率为23.339%,影响该主成分的主要特征向量为超氧阴离子自由基清除率、维生素C 含量、羟基自由基清除率与总黄酮含量,分别为0.843、0.789、0.606 与-0.502。第三主成分的贡献率为14.273%,影响该主成分的主要特征向量为花青素含量与总黄酮含量,分别为0.900 与0.550。第一主成分和第二主成分的累计方差贡献率达到63.118%,因此第一主成分与第二主成分包含的项目为软枣猕猴桃抗氧化能力的主要测定项目。
软枣猕猴桃果实抗氧化能力是评价其品质的重要指标之一。通过差异分析结果显示,B020802 的总酚含量和总黄酮含量显著高于其他资源,魁绿的维生素C 含量显著高于其他资源,因此B020802 和魁绿可以作为原料进行功能性产品的开发。通过加权综合评分法对32 份软枣猕猴桃资源的抗氧化能力进行综合评价筛选出B080401、A180902、A100703、B020802、A100101 为排名前5 的资源。通过相关性分析结果显示,总酚、总黄酮和维生素C 含量与果实抗氧化活性存在相关性,且抗氧化综合评价值与总酚含量和维生素C含量呈极显著正相关。王菲等[23]研究表明软枣猕猴桃总黄酮对DPPH 自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基有一定的清除作用,且抗氧化作用与总黄酮含量呈正相关。李斌等[24]研究结果表明酚类是软枣猕猴桃中最主要的抗氧化活性物质。研究结果表明DPPH 自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、总抗氧化能力和总还原力与抗氧化综合评价值呈极显著正相关,说明这4 种测定方法适用于软枣猕猴桃抗氧化活性测定。通过主成分分析结果显示,第一主成分和第二主成分的累计方差贡献率达到63.118%,总酚含量、总黄酮含量、维生素C 含量、DPPH 自由基清除率、羟基自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、总抗氧化能力和总还原力为软枣猕猴桃抗氧化能力的主要测定项目。
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