刺玫果（Rosa davurica Pall.）为蔷薇科蔷薇属植物山刺玫的成熟果实[1]，含有丰富的多糖、黄酮、皂苷、鞣质等成分[2-3]。目前对刺玫果研究的重点是其活性成分的提取及生物活性的考察，如抗氧化、抗肿瘤、降血糖等[4]。皂苷是一类以三萜或螺旋甾烷类化合物为苷元，并与糖苷结合的化合物[5]。皂苷一般用乙醇提取法进行提取[6]。多糖具有抗氧化、清除自由基[7]的作用，在抗肿瘤、降血糖、减少糖尿病并发症等方面具有较好的生物活性。多糖提取的主要方法有水提法、酶提法、超声辅助提取法[8]、微波辅助提取法[9]等，提取时应避免温度过高导致多糖水解，或超声时间过长导致结构被破坏，其它物质溶出降低多糖得率[10]。黄酮的主要提取方法为超声辅助或微波辅助提取法、溶剂提取法等[11]。以上方法只能单独提取一类成分，造成原料和提取溶剂的浪费，柱层析法原理是利用药材中各组分性质的不同（如极性、分子大小、形状和分配系数等），使各组分以不同的速度从材料中转移到流动相中，提取液即流动相分子在充满材料的柱体中自上而下流动，洗脱它所流经的材料颗粒，柱层析法广泛应用于天然产物提取及化学成分分离中。本研究利用柱层析单独提取与循环联合提取，探究活性成分的含量及提取率，与传统的从一种原料中提取一类活性成分相比，柱层析循环联合法可以从一种原料中同时提取三类活性成分，提高原料利用率；柱层析循环联合法提取的过程中每轮目标成分的提取液只需保留前1 份～2 份，下一份作为下一轮的提取溶剂，即在提取溶剂中增加了目标成分的含量，该方法节约提取溶剂和原料，可同时提取多种成分，工艺简单，常温即可进行，避免热敏性物质被破坏，适合于工业化生产，与传统方法相比具有提取效率高、操作时间短、节约溶剂等优势[12-15]，为有效地提取多糖、总黄酮、总皂苷提供了新途径。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
刺玫果：安徽省亳州市医药有限公司，经吉林化工学院化学与制药工程学院薛健飞博士鉴定，为蔷薇科植物山刺玫的干燥成熟果实；芦丁（98.00%，光谱纯）、熊果酸（≥99.70，色谱纯）：成都曼思特生物科技有限公司；葡萄糖标准品：天津市瑞金特化学品有限公司；α-葡萄糖苷酶（≥98%，100 000 U/g 黑曲霉）：上海宝曼生物科技有限公司；4-硝基苯α-D-吡喃半乳糖苷（p-nitrophenylα-D-galactopyranoside，PNPG）：北京梦怡美生物科技有限公司；阿卡波糖（98%）：西安拓丰生物科技有限公司；苯酚、维生素C（分析纯）：天津市永大化学试剂有限公司；盐酸萘乙二胺（分析纯）：天津市化学试剂研究所有限公司；浓盐酸（优级纯）：天津市凯信化学工业有限公司；浓硫酸（优级纯）：西陇化工股份有限公司；无水甲醇（分析纯）：辽宁泉瑞试剂有限公司；纯化填料（大孔树脂D101）：西安蓝晓科技新材料股份有限公司；香草醛（分析纯）：天津市光复精细化工研究所；冰醋酸、无水乙醇、碳酸氢钠、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、磷酸二氢钠、碳酸钠（均为分析纯）：天津市大茂化学试剂厂。
1.2 仪器与设备
紫外可见分光光度仪（TU-1950 型）：北京普析通用仪器有限责任公司；台式高速离心机（H1850 型）：湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；酶标仪（PL-9602）：北京普朗新技术有限公司；电子分析天平（FN2004N型）：上海精密科学仪器有限公司；电热鼓风干燥箱（XMTD-8222 型）：上海精宏实验设备有限公司；旋转蒸发仪（RE-52C 型）：上海亚荣生化仪器厂；数显恒温振荡器（CHA-S）：金坛市华城开元试验仪器厂。
1.3 方法
1.3.1 刺玫果肉目标成分含量测定
1.3.1.1 刺玫果肉多糖含量测定
采用苯酚-浓硫酸法[16]绘制葡萄糖标准曲线。以葡萄糖为对照品，于490 nm 处测定吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据下列公式计算出刺玫果肉中多糖的含量。
式中：Cx 为刺玫果肉提取液中多糖的含量，μg/mL；Vx 为提取液的体积，mL；f 为稀释倍数；mx 为刺玫果肉粉末的质量，g；1 000 为换算系数。
1.3.1.2 刺玫果肉总黄酮含量测定
采用硝酸铝络合法[17]绘制芦丁标准曲线。以芦丁为对照品，于505 nm 处测定吸光度，以芦丁浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据下列公式计算出刺玫果肉中总黄酮的含量。
式中：Cy 为刺玫果肉提取液中总黄酮的含量，mg/mL；Vy 为提取液的体积，mL；f 为稀释倍数；my 为刺玫果肉粉末的质量，g。
1.3.1.3 刺玫果肉总皂苷含量测定
采用香草醛-浓硫酸法[18]绘制熊果酸标准曲线。以熊果酸为对照品，于544 nm 处测定吸光度，以熊果酸浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据公式计算出刺玫果肉中总皂苷的含量。
式中：Cz 为刺玫果肉提取液中总皂苷的含量，μg/mL；Vz 为提取液的体积，mL；f 为稀释倍数；mz 为刺玫果肉粉末的质量，g；1 000 为换算系数。
1.3.2 样品上柱前处理工艺条件的确定
1.3.2.1 工艺流程
本试验的工艺流程如下。
1.3.2.2 乙醇体积分数的确定
精密称取1.0 g 刺玫果肉粉末18 份，并列3 组，分别加入体积分数为0%、20%、40%、60%、80%、100%乙醇-水溶液10 mL，室温摇床振荡（200 r/min）1 h，6 000 r/min离心10 min，即为供试品溶液。按照多糖、总黄酮、总皂苷的含量测定方法，计算刺玫果肉中3 类目标成分的含量，确定最佳乙醇体积分数。
1.3.2.3 吸涨体积及浸泡平衡时间的确定
精密称取1.0 g 刺玫果肉粉末18 份，并列3 组，分别加入相应的提取溶剂10 mL，室温摇床振荡（200 r/min），浸泡时间分别为0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 h，6 000 r/min离心10 min，分别测定上清液体积，用总体积（10 mL）减去上清液体积，即刺玫果肉的吸涨体积（mL）[19]。另外，分别测定刺玫果肉中3 类目标成分的含量，确定浸泡平衡时间。
1.3.2.4 超声时间的确定
精密称取1.0 g 刺玫果肉粉末15 份，并列3 组，分别加入相应的提取溶剂10 mL，室温超声辅助提取10、15、20、25、30 min，室温摇床振荡（200 r/min）1 h，6 000 r/min 离心10 min，分别测定刺玫果肉中3 类目标成分的含量，确定柱层析单独提取的最佳超声时间。
1.3.3 柱层析提取法
精密称取3 份刺玫果肉粉末5.0 g，选取3 根直径为1.5 cm 的玻璃层析柱，按照料液比1∶1 吸涨体积（g/mL）搅拌均匀，超声一定时间，将混合后的样品加入到玻璃层析柱（无其他填料）中进行提取，室温静置至相应的浸泡平衡时间，以1 吸涨体积为一个收集单位，以0.4 mL/min 的流速收集，共收集3 份提取液，残渣加入1 吸涨体积的提取溶剂，超声1 h，抽滤得到1 份提取液，分别测定4 份提取液中多糖、总黄酮、总皂苷的含量；计算刺玫果肉粉末中多糖、总黄酮、总皂苷的总量，并确定提取次数。
1.3.4 柱层析循环联合法
在锥形瓶中加入5.0 g 刺玫果肉粉末和14 mL 40%乙醇-水溶液，超声，转移至玻璃层析柱中，静置4 h，以1 吸涨体积为1 个收集单位，流速为0.4 mL/min，收集3 份，提取溶剂更换为20%乙醇-水溶液，收集3 份，提取溶剂更换为纯水，收集3 份。后3 根层析柱均在上样后浸泡4 h，保留各提取液的前2 份，第3 份均作为下一根层析柱的第1 份提取溶剂，重复循环，4 根层析柱连续进行。分别测定前2 份提取液中多糖、总黄酮、总皂苷的含量，并计算提取率。
式中：Tx 为每根层析柱中多糖、总黄酮、总皂苷前2 份提取液中所含目标成分的含量，mg/g；T0 为1.3.3中分别提取时多糖、总黄酮、总皂苷提取液中所含相应目标成分的总量，mg/g。
1.3.5 刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷的分离
合并4 根层析柱的总黄酮提取液，减压浓缩至相当于1 g/mL 的浓缩液，加无水乙醇至乙醇体积分数为80%，充分摇匀，冰箱4 ℃静置过夜，6 000 r/min 离心10 min，总黄酮上清液、粗多糖沉淀待用，将粗多糖沉淀再用少量蒸馏水溶解，加无水乙醇至乙醇体积分数为80%，重复以上操作，合并总黄酮上清液。总黄酮溶在上清液中，沉淀为粗多糖，将总黄酮上清液浓缩至稠膏，干燥成总黄酮干浸膏，测定总黄酮干浸膏中总黄酮的含量并计算得率。
合并4 根层析柱的总皂苷提取液和多糖提取液，减压浓缩至相当于1 g/mL 的浓缩液，按照上述醇沉法操作将多糖提取液和总皂苷提取液浓缩至稠膏，干燥成粗多糖干浸膏和总皂苷干浸膏，将上述2 份粗多糖干浸膏合并，分别测定粗多糖干浸膏中多糖的含量、总皂苷干浸膏中总皂苷的含量及其相应得率。
1.3.6 刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷的纯化
将1.3.5 得到的总黄酮干浸膏加蒸馏水稀释至浓度为0.025 g/mL 的分散液。取经处理的D-101 型吸附树脂45 g，湿法装柱，以1 BV/h 的流速进行吸附，以3 BV/h 的流速进行洗脱，用40%乙醇-水溶液以1 BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压蒸发，浓缩干燥至恒重，测定总黄酮干浸膏中总黄酮的含量，并计算得率。总皂苷干浸膏用20%乙醇-水溶液洗脱，其余操作同上。
将粗多糖重新溶于水中，80%乙醇沉淀，冰箱4 ℃静置过夜，6 000 r/min 离心10 min，得到多糖沉淀，再重复沉淀1 次，沉淀经干燥得多糖粉末，测定多糖含量及得率。
1.3.7 α-葡萄糖苷酶抑制率的测定
准备一个96 孔板，依次加入80 μL 的磷酸盐缓冲溶液，20 μL 2.5 mmol/L 的PNPG 底物溶液，最后分别加入20 μL（浓度为0.02、0.06、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mg/mL）多糖、总黄酮供试品溶液，（浓度为0.02、0.06、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/mL）总皂苷供试品溶液，37 ℃水浴加热10 min，加入20 μL 的α-葡萄糖苷酶溶液，37 ℃水浴加热1 h，加入100 μL 0.2 mol/L 的Na2CO3 溶液终止反应，室温放置15 min，用酶标仪于405 nm 处测定吸光度Ay；用20 μL 磷酸盐缓冲溶液代替20 μL 供试品溶液，同上操作得Ak；用20 μL 磷酸盐缓冲溶液代替20 μL α-葡萄糖苷酶溶液，同上操作得Ab；计算供试品溶液对α-葡萄糖苷酶的抑制率和IC50[20]。将阿卡波糖配制成（浓度为1.01、3.01、5.01、7.01、10.02、20.05 mg/mL）供试品溶液，按上步骤，计算其对α-葡萄糖苷酶的抑制率，以质量浓度为横坐标，供试品溶液和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率为纵坐标绘制标准曲线，并计算IC50。
1.3.8 亚硝酸盐清除率的测定
依次取1.0 mL 浓度为0.01、0.10、0.20、0.60、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00 mg/mL 的多糖供试品溶液，浓度为0.20、0.60、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00 mg/mL 的总黄酮供试品溶液，浓度为0.20、0.60、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00、4.00 mg/mL 的总皂苷供试品溶液，加入7.5 mL 的模拟胃酸溶液，2.5 mL 10 μg/mL的亚硝酸钠溶液，在37 ℃恒温水浴环境下加热30 min，取出后依次加入0.5 mL 的0.4%对氨基苯磺酸溶液，室温静置15 min，加入0.25 mL 的0.2%盐酸萘乙二胺溶液、7 mL 蒸馏水，混合均匀，室温静置15 min，空白溶液为模拟胃酸溶液，于538 nm 处测定吸光度[21]Ay；供试品溶液的本底吸光度为Ab；不加供试品的溶液的吸光度为Ak。维生素C 作为对照，将维生素C 配制成供试品溶液（浓度为0.10、0.20、0.60、1.00、1.50 mg/mL），操作同上，亚硝酸盐清除率计算公式如下。
1.4 数据处理
数据均采用origin8.0 进行处理。
2 结果与分析
2.1 刺玫果肉目标成分含量
2.1.1 刺玫果肉多糖含量
葡萄糖标准曲线如图1 所示。
图1 葡萄糖标准曲线
Fig.1 Standard curve of glucose
葡萄糖标准曲线回归方程为y=0.053 6x-0.043 3，R2=0.999 5。葡萄糖浓度为2.425 6 μg/mL～16.979 2 μg/mL时线性关系良好，可根据标准曲线进行多糖的含量测定。
2.1.2 刺玫果肉总黄酮含量
芦丁标准曲线如图2 所示。
图2 芦丁标准曲线
Fig.2 Standard curve of rutin
芦丁标准曲线回归方程为y=14.661x-0.066 2，R2=0.999 6。芦丁浓度为0.016 5 mg/mL～0.049 6 mg/mL 时线性关系良好，可根据标准曲线进行总黄酮的含量测定。
2.1.3 刺玫果肉总皂苷含量
熊果酸标准曲线如图3 所示。
图3 熊果酸标准曲线
Fig.3 Standard curve of ursolic acid
熊果酸标准曲线回归方程为y=25.271x+0.071 2，R2=0.998 0。熊果酸浓度为0.004 μg/mL～0.024 μg/mL时线性关系良好，可根据标准曲线进行总皂苷的含量测定。
2.2 提取工艺条件的确定
2.2.1 乙醇体积分数的确定
乙醇体积分数对刺玫果肉中目标成分含量的影响如图4 所示。
图4 乙醇体积分数对刺玫果肉中目标成分含量的影响
Fig.4 Effect of ethanol volume fraction on the content of target components in the fruit pulp of Rosa davurica Pall.
如图4 所示，1 g 刺玫果肉的提取液中，当提取溶剂的乙醇体积分数为0%，即为纯水时，多糖的含量达到最大值，为（371.81±8.44）mg/g；当提取溶剂的乙醇体积分数为40%时，总黄酮的含量达到最大值，为（119.05±3.14）mg/g；当提取溶剂的乙醇体积分数为20%时，总皂苷的含量达到最大值，为（13.51±0.22）mg/g。利用柱层析循环联合法提取时，利用不同乙醇体积分数的提取溶剂对相应成分进行提取。
2.2.2 吸涨体积及浸泡平衡时间的确定
浸泡平衡时间对刺玫果肉中目标成分吸涨体积的影响如图5、图6 所示。
图5 浸泡平衡时间对刺玫果肉中目标成分吸涨体积的影响
Fig.5 Effect of soaking equilibrium time on the swelling volume of target components in the fruit pulp of Rosa davurica Pall.
图6 浸泡平衡时间对刺玫果肉中目标成分含量的影响
Fig.6 Effect of soaking equilibrium time on the content of target components in the fruit pulp of Rosa davurica Pall.
由图5 可知，不同浸泡平衡时间刺玫果肉在不同溶剂中的吸附性能不同。刺玫果肉总黄酮的吸涨体积为（3.20±0.04）mL；刺玫果肉多糖、总皂苷的吸涨体积均为（2.80±0.04）mL。因此提取刺玫果肉总黄酮时溶剂用量按照其质量的3.2 倍进行收集；提取刺玫果肉多糖、总皂苷时提取溶剂用量均按照其质量的2.8 倍进行收集。
由图6 可知，随着浸泡平衡时间延长，浸泡液中多糖、总黄酮、总皂苷的含量逐渐增大。当浸泡平衡时间分别达到1、4、3 h 后，浸泡液中多糖、总黄酮、总皂苷的含量基本不再发生变化。提取刺玫果肉中多糖、总黄酮、总皂苷的浸泡平衡时间分别为1、4、3 h。在柱层析循环联合法提取时，均选择较长者作为浸泡平衡时间，即4 h。
2.2.3 超声时间的确定
超声时间对刺玫果肉中目标成分含量的影响如图7 所示。
图7 超声时间对刺玫果肉中目标成分含量的影响
Fig.7 Effect of ultrasound time on the content of target components in the fruit pulp of Rosa davurica Pall.
由图7 可知，1 g 刺玫果肉提取液中，当超声时间为25min 时，多糖含量达到最大值，为（375.59±11.06）mg/g；当超声时间为20 min 时，总黄酮含量达到最大值，为（125.15±3.34）mg/g；当超声时间为20 min 时，总皂苷含量达到最大值，为（13.85±0.08）mg/g。因此，选择超声辅助25 min 单独提取多糖；超声辅助20 min 单独提取总黄酮；超声辅助20 min 单独提取总皂苷。
2.3 柱层析法分别提取结果
多糖、总黄酮、总皂苷总量及提取次数的确定如图8 所示。
图8 多糖、总黄酮、总皂苷总量及提取次数的确定
Fig.8 Determination of total polysaccharides，total flavonoids，and total saponins and extraction times
由图8 可知，在3 份提取液与1 份残渣提取液中多糖的含量分别为199.70、113.26、25.96、20.38 mg/g，多糖总量为359.30 mg/g；总黄酮的含量分别为154.54、47.23、19.54、4.29 mg/g，总黄酮总量为225.60 mg/g；总皂苷的含量分别为13.78、5.54、1.57、0.59 mg/g，总皂苷总量为21.48 mg/g。分别提取时多糖、总黄酮、总皂苷的前3 份占总量的百分率分别为94.33%、98.10%、97.25%，基本可视为完全提取。因此多糖、总黄酮、总皂苷均需要收集3 份提取液，由于第3 份提取液中目标成分的含量较低，所以将第3 份提取液作为下一根层析柱的提取溶剂。
2.4 柱层析循环联合法提取结果
柱层析循环联合法提取目标成分含量的结果如图9 所示。
图9 柱层析循环联合法提取目标成分的含量
Fig.9 The content of the target components extraction by circulating column chromatography
由图9 可知，4 根层析柱中多糖前2 份提取液中多糖的含量分别为261.06、279.65、301.98、323.50 mg/g；总黄酮前2 份提取液中总黄酮的含量分别为201.83、205.86、209.63、212.93 mg/g；总皂苷前2 份提取液中总皂苷的含量分别为19.31、19.71、20.63、20.79 mg/g；在第1 根联合提取的层析柱中，多糖、总皂苷的含量与单独提取相比略低，可能用40%乙醇-水溶液提取总黄酮时，将一小部分多糖和总皂苷携带下来，含量略有降低，但在后3 根层析柱中，目标成分的含量逐渐增加。利用柱层析法在常温即可提取，可防止温度过高使热敏性物质被破坏，料液比为1∶2.8（g/mL）～1∶3.2（g/mL），相对节约溶剂、提高效率。
4 根层析柱中多糖前2 份的提取率分别为72.66%、77.83%、84.05%、90.04%；总黄酮前2 份的提取率分别为89.50%、91.23%、92.92%、94.39%；总皂苷前2 份的提取率分别为89.90%、91.76%、96.04%、96.79%。虽然联合提取的提取率相较于单独提取略低，但联合提取相对节约溶剂，提高得率，原因是将含有低浓度目标成分的提取液作为下一根层析柱的提取溶剂，在原有的基础上，在提取溶剂中增加了目标成分的含量，使提取率随着层析柱的增多而逐渐提高。柱层析单独提取多糖后，原料被废弃失去使用价值，原料中的总黄酮及总皂苷等成分未被提取会造成资源浪费，同理单独提取总黄酮时，原料中的多糖及总皂苷也会被浪费，联合提取可避免原料浪费，最后用醇沉法及大孔树脂将3 类成分分开，与现有研究相比，该方法具有节约溶剂，对温度的需求低的优点，适用于工业化生产，优化了传统的提取工艺。
2.5 刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷的分离结果
合并刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷联合提取时各自的提取液，经过浓缩、醇沉、干燥，分别得到多糖、总黄酮、总皂苷的干浸膏，多糖、总黄酮、总皂苷干浸膏中相应目标成分的含量分别为428.5、484.5、122.5 mg/g，其得率分别为10.01%、16.12%、11.53%。
2.6 刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷的纯化结果
多糖干浸膏经过2 次醇沉后，其多糖含量从428.5 mg/g 提升到804.1 mg/g，得率为6.32%；总黄酮干浸膏纯化后，其总黄酮含量从484.5 mg/g 提升到772.7 mg/g，得率为2.97%；总皂苷干浸膏纯化后，其总皂苷含量从122.5 mg/g 提升到396.4 mg/g，得率为2.51%。
2.7 α-葡萄糖苷酶抑制率的测定结果
α-葡萄糖苷酶抑制率的测定结果如图10、图11 所示。
图10 提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力
Fig.10 Inhibition of α-glucosidase activity by the extract
图11 阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力
Fig.11 Inhibition of α-glucosidase activity by acarbose
刺玫果肉目标成分的提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力与浓度呈正相关趋势，即随着提取物浓度的增大，抑制率也增大；刺玫果肉多糖提取物对α-葡萄糖苷酶IC50 为0.714 8 mg/mL；刺玫果肉总黄酮提取物对α-葡萄糖苷酶IC50 为0.610 4 mg/mL；刺玫果肉总皂苷提取物对α-葡萄糖苷酶IC50 为0.461 9 mg/mL；阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶IC50 为10.000 0 mg/mL；说明刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力强于阿卡波糖，预示着可能具有较强的降血糖活性。
2.8 亚硝酸盐清除率的测定结果
不同浓度提取物对亚硝酸盐的清除能力如图12所示。
图12 不同浓度提取物对亚硝酸盐的清除能力
Fig.12 Nitrite-scavenging ability of extracts with different concentrations
由图12 可知，刺玫果肉活性成分的提取物对亚硝酸盐的清除能力与浓度呈正相关趋势，即随着提取物浓度的增大，清除率也增大；刺玫果肉多糖提取物对亚硝酸盐IC50 为0.843 1 mg/mL；刺玫果肉总黄酮提取物对亚硝酸盐IC50 为2.694 8 mg/mL；刺玫果肉总皂苷提取物对亚硝酸盐IC50 为1.470 9 mg/mL；维生素C 对照对亚硝酸盐IC50 为0.529 1 mg/mL；说明刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷提取物可能具有一定的清除亚硝酸盐的能力。
3 结论
本试验通过柱层析循环联合法提取刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷，分别采用料液比为1∶2.8（g/mL）的纯水、料液比为1∶3.2（g/mL）的40%乙醇-水溶液、料液比为1∶2.8（g/mL）的20%乙醇-水溶液进行收集，超声时间25、20、20 min，浸泡4 h。在此条件下，第4 根层析柱中多糖、总黄酮、总皂苷前2 份提取液中相应活性成分的提取率均超过90%，将多糖、总黄酮、总皂苷前2 份提取液合并后进行醇沉，得到多糖、总黄酮、总皂苷干浸膏，干浸膏中多糖、总黄酮、总皂苷的含量分别为428.5、484.5、122.5 mg/g；纯化后，干浸膏中的多糖、总黄酮、总皂苷的含量分别为804.1、772.7、396.4 mg/g。柱层析法可同时提取多糖、总黄酮、总皂苷，节约溶剂，增加得率。醇沉法和大孔树脂可将3 类成分分开，常温即可进行，避免热敏性物质被破坏，节约溶剂，适用于工业化生产刺玫果肉多糖、总黄酮、总皂苷提取物均具有较强的体外降糖作用以及一定的清除亚硝酸盐的能力，为刺玫果系列功能性食品的研制与开发提供了数据基础。
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