复配酶酶解对燕麦浊汁的稳定性研究

张晓旻1,刘靓2,刘敏尧2,郭梅1*

(1.天津农学院食品科学与生物工程学院,天津 300384;2.天津诺奥酶生产力促进有限公司,天津 300399)

摘 要:以离心沉淀率为检测指标,研究复配酶制备燕麦浊汁的酶解工艺。采用单因素试验,考察复配酶的添加量、酶解温度、酶解pH值、酶解时间4个因素对燕麦浊汁稳定性的影响,并通过正交试验确定燕麦浊汁酶解的最佳工艺参数:复配酶添加量0.3%,酶解pH 6.4,酶解温度55℃,酶解时间80 min。在此工艺条件下,燕麦浊汁离心沉淀率为17.6%。

关键词:燕麦浊汁;复配酶;酶解;离心沉淀率;正交试验

燕麦(Avena sativa L.)为禾本科植物,《本草纲目》中称之为雀麦、野麦子。燕麦分为带稃型(皮燕麦)和裸粒型(裸燕麦)两种。俄罗斯、加拿大、波兰、美国、中国、澳大利亚是燕麦的主要种植国[1]。国外主要种植皮燕麦,我国栽培的燕麦以裸燕麦为主。燕麦作为重要粮食之一,在全世界谷物产量中仅次于小麦、水稻、玉米、大麦和高粱,排名第六。

燕麦是一种“食疗兼备”作物,被誉为“九粮之尊”,它是一种全价营养谷物,在蛋白质、脂肪、维生素、矿物元素、膳食纤维等五大营养物质的指标中,位居我国9种粮食作物(小麦、水稻、谷子、玉米、大麦、荞麦、高粱、黄米、燕麦)之首[2]。燕麦性味甘、平,能益脾养心、敛汗,有较高的营养价值。燕麦富含β-葡聚糖、蛋白质、亚油酸和膳食纤维等成分,且富含人体所必需的8种氨基酸,营养均衡,对于人体补充营养与保持健康有很大的利用价值。燕麦在辅助降血糖、降血压、减肥保健、预防直肠癌及心血管疾病等方面具有世界公认的保健作用[3-5]

目前,我国已开发研制的燕麦制品主要包括燕麦片、燕麦粉、燕麦面包、燕麦米、燕麦饼干、燕麦挂面等[6-9],但市场上主要以燕麦片的形式销售。燕麦作为学生党和上班族的营养谷物早餐,也是中老年人减肥保健食品最主要的替代餐,其产品形式单一,适口性较差。近年来,燕麦新产品加工是粮食加工的一个新研究方向[10-11],具有良好的发展前景,符合广大消费者的需求,尤其以燕麦为原料的谷物饮品是重点研究方向之一[12-15]

在欧洲、美国和日本,燕麦制成的纯谷物饮料是较为常见的,例如燕麦奶、燕麦甜酒、有机燕麦饮料等产品。但是燕麦饮料的制备比较困难,稳定性较差。在燕麦汁的加工中,燕麦中的淀粉很容易与β-葡聚糖形成胶体[16],再加上淀粉在储藏过程中也容易出现老化,形成团块,会造成燕麦饮料质地不均匀、食用风味变劣等一系列问题[17]。国内对燕麦饮品的研究也有报道,其主要工艺是将淀粉酶解成小分子,现有酶解工艺的研究大多局限于单一酶的应用研究[18-20],因此,本试验通过复配酶水解燕麦,探讨酶解程度对燕麦浊汁稳定性的影响,对其酶解工艺进行研究,从而能够制备出质地均匀、稳定性强、口感良好的燕麦浊汁饮品。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

燕麦:市购;α-淀粉酶(20 000 U/g)、葡糖淀粉酶(50 000 U/g)、支链淀粉酶(50 000 U/g):天津诺奥酶生产力促进有限公司。

电子天平(FA2004型):北京塞多利斯仪器有限公司;数显恒温水浴锅(HHS型):江苏金坛市金城国盛试验仪器厂;高速台式离心机(16WS型):湖南湘仪离心机仪器有限公司;胶体磨(MS型):廊坊正瑞机械有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 工艺流程

燕麦→浸泡→磨浆→过滤→蒸煮→液化→复配酶水解→灭酶→调配→均质→罐装→杀菌→冷却→成品

1.2.2 操作要点

1)浸泡:将燕麦原料清洗后,取50 g燕麦原料加250 mL水,在水浴锅中40℃浸泡2 h。

2)磨浆、蒸煮:燕麦和浸泡液通过胶体磨磨浆,控制加水量,料液比为 1∶9(g/mL),过 200目筛得到燕麦浊汁,再进行蒸煮使燕麦汁充分糊化。

3)液化、复配酶水解:燕麦汁温度降至80℃,加入高温α-淀粉酶[21-22],添加量0.1%,液化60 min。然后冷却降温再加入复配酶(葡糖淀粉酶与支链淀粉酶按质量比1∶1进行混合),考察不同复配酶添加量、酶解温度、酶解pH值、酶解时间4个因素对燕麦浊汁离心沉淀率的影响。

4)灭酶、调配、均质:酶解糖化后的燕麦浊汁升温至80℃,灭酶10 min。进行调配后,高压均质两次,压力分别为20 MPa和40 MPa。

5)灌装、杀菌、冷却:灌装到事先清洗过的玻璃瓶中,封口、杀菌后冷却至室温25℃。

1.2.3 离心沉淀率的测定

准确称取一定量样品置于离心管中,5 000 r/min下离心20 min,倾去上清液,将装有沉淀的离心管倒置30 min,准确称取沉淀质量,计算离心沉淀率(centrifugal sedimentation rate,SR)。每个样品进行3次平行测定,取其平均值,离心沉淀率越小则代表饮料的稳定性越好[18]

SR/%=(M1/M2)×100

式中:M1为离心后沉淀物的质量,g;M2为离心前样品的质量,g。

1.2.4 单因素试验

1.2.4.1 复配酶添加量对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

采用酶解温度50℃,酶解pH6.4,酶解时间60min,考察复配酶添加量为0.15%、0.20%、0.25%、0.30%、0.35%条件下燕麦浊汁的离心沉淀率。

1.2.4.2 酶解时间对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

采用复配酶添加量0.25%,酶解温度50℃,酶解pH 6.4,考察酶解时间为 40、60、80、100、120 min 条件下燕麦浊汁的离心沉淀率。

1.2.4.3 酶解温度对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

采用复配酶添加量0.25%,酶解pH6.4,酶解时间60 min,考察酶解温度为 45、50、55、60、65 ℃条件下燕麦浊汁的离心沉淀率。

1.2.4.4 酶解pH值对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

采用复配酶添加量0.25%,酶解温度50℃,酶解时间 60 min,考察酶解酶解 pH 值为 5.6、6.0、6.4、6.8、7.2条件下燕麦浊汁的离心沉淀率。

1.2.5 正交试验

根据单因素试验的结果,进行L9(34)正交试验,确定出利用复配酶制取燕麦浊汁的最佳工艺参数。因素水平见表1。

表1 正交试验因素水平设计
Table 1 Factors and levels of orthogonal tests

水平 A复配酶添加量/%B酶解时间/h C酶解温度/℃D酶解pH值1 0.25 60 50 6.0 2 0.30 80 55 6.4 3 0.35 100 60 6.8

1.3 数据处理

每个数据均为3次试验的平均值,使用EXCEL软件对数据进行统计分析并绘制图表。

2 结果与分析

2.1 复配酶添加量对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

复配酶添加量对离心沉淀率的影响见图1。

图1 复配酶添加量对离心沉淀率的影响
Fig.1 Effects of the amount of compound enzymes on SR

由图1可知,燕麦浊汁离心沉淀率随着复配酶添加量的增加而逐渐降低。由于复配酶中的支链淀粉酶能分解支链淀粉分支处的α-1,6糖苷键,形成直链淀粉和糊精,糖化复配酶可同时水解α-1,4糖苷键和α-1,6糖苷键,淀粉被水解后提高了其溶解性。当酶用量超过0.30%时,离心沉淀率的变化开始趋于平缓,再提高复配酶添加量对燕麦浊汁离心沉淀率影响并不大。因此,可选择复配酶用量3个较优水平0.25%、0.30%、0.35%进行正交试验。

2.2 酶解时间对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

酶解时间对离心沉淀率的影响见图2。

图2 酶解时间对离心沉淀率的影响
Fig.2 Effects of enzymolysis time on SR

由图2可知,复配酶酶解时间越长,燕麦浊汁离心沉淀率不断减小,且速度越来越慢,原因是燕麦中的淀粉被连续水解,当酶解时间大于80 min时,离心沉淀率变化不大,酶解时间过长,对增加燕麦淀粉水解程度没有太大的效果,反而会影响生产效率,综合生产时间成本因素,故可选择酶解时间3个较优水平60、80、100 min 进行正交试验。

2.3 酶解温度对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

酶解温度对离心沉淀率的影响见图3。

图3 酶解温度对离心沉淀率的影响
Fig.3 Effects of enzymolysis temperature on SR

由图3可知,随着温度的升高,离心沉淀率先降低后升高,离心沉淀率在55℃时最小,燕麦浊汁的稳定性最好。可能是因为该复配酶的最佳酶解温度约在55℃,此时酶活性可以达到最大化,淀粉的水解程度较高,当酶解温度超过55℃后,再提高温度反而会影响部分酶的活性,从而降低复配酶的酶解能力。由此可知,酶解温度可选择3个较优水平50、55、60℃进行正交试验。

2.4 酶解pH值对燕麦浊汁离心沉淀率的影响

酶解pH值对离心沉淀率的影响见图4。

图4 酶解pH值对离心沉淀率的影响
Fig.4 Effects of enzymolysis pH on SR

由图4可知,酶解pH 5.6~6.4时,随pH值的增加燕麦浊汁离心沉淀率呈下降趋势,在pH 6.4时达到最小,酶解pH6.4~7.2阶段时,离心沉淀率又趋于上升,分析原因可能是因为该复配酶在pH6.4时活性最高,而偏酸或偏碱都会使复配酶的活性受到不同程度影响。所以,酶解pH值可选择3个较优水平6.0、6.4、6.8进行正交试验。

2.5 正交试验结果

在单因素试验的基础上,根据L9(34)的正交表设计,进行四因素三水平的正交试验,确定出最佳工艺参数。正交试验结果见表2。

表2 正交试验结果
Table 2 Results of orthogonal tests

试验号 因素 离心沉淀率/%A B C D 1 1 1 1 1 27.2 2 1 2 2 2 22.3 3 1 3 3 3 25.6 4 2 1 3 2 21.6 5 2 2 1 3 23.4 6 2 3 2 1 20.1 7 3 1 2 3 24.6 8 3 2 3 1 22.8 9 3 3 1 2 23.5 K1 75.1 73.4 74.1 70.1 K2 65.1 68.5 67.0 67.4 K3 70.9 69.2 70.0 73.6 k1 25.0 24.5 24.7 23.4 k2 21.7 22.8 22.3 22.5 k3 23.6 23.1 23.3 24.5 R 3.3 1.7 2.4 2.0各因素影响顺序 A>C>D>B最优组合 A2B2C2D2

由表2中的极差分析可知,影响燕麦浊汁离心沉淀率的因素主次顺序为:复配酶添加量>酶解温度>酶解pH值>酶解时间。最佳组合为A2B2C2D2,即复配酶添加量为0.30%,酶解pH值为6.4,酶解温度为55℃,酶解时间为80 min。采用A2B2C2D2工艺组合进行验证试验,重复3次,测得该组合离心沉淀率平均为17.6%。

3 结论

通过单因素试验初步考察了复配酶添加量、酶解pH值、酶解温度、酶解时间对燕麦浊汁稳定性的影响水平,再进行正交试验,确定了影响燕麦浊汁离心沉淀率的主次顺序:复配酶添加量>酶解温度>酶解pH值>酶解时间。最佳酶解工艺参数:复配酶添加量0.3%,酶解pH 6.4,酶解温度55℃,酶解时间80 min,此条件下,燕麦浊汁离心沉淀率为17.6%,稳定性最好。

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Effects of Hydrolysis Using an Enzyme Mixture on Stability of Turbid Oat Juice

ZHANG Xiao-min1,LIU Jing2,LIU Min-yao2,GUO Mei1*
(1.College of Food Science and Biotechnology,Tianjin Agriculture University,Tianjin 300384,China;2.Tianjin Nuoao Enzyme Productivity Promotion Co.,Ltd.,Tianjin 300399,China)

Abstract:Efficacy of turbid oat juice hydrolysis using a mixture of enzymes was assessed by determining centrifugal sedimentation rates.Using single factor and orthogonal test methods,the effects of enzyme mixture concentration,enzymolysis temperature,enzymolysis pH,and enzymolysis time on turbid oat juice stability were analyzed.The optimum processing parameters were 0.3% enzyme mixture,pH 6.4,55℃,for 80 min.Under these conditions,the centrifugal sedimentation rate of turbid oat juice was 17.6%.

Key words: oat turbid juice;compound enzymes;enzymolysis;centrifugal sedimentation rate;orthogonal test

DOI:10.12161/j.issn.1005-6521.2021.01.012

基金项目:天津市科技计划项目(20YDTPJC01830)

作者简介:张晓旻(1996—),女(汉),本科,研究方向:食品科学。

*通信作者:郭梅(1966—),女(汉),教授,博士,研究方向:食品科学与生物工程。

引文格式:

张晓旻,刘靓,刘敏尧,等.复配酶酶解对燕麦浊汁的稳定性研究[J].食品研究与开发,2021,42(11):72-76.

ZHANG Xiaomin,LIU Jing,LIU Minyao,et al.Effects of Hydrolysis Using an Enzyme Mixture on Stability of Turbid Oat Juice[J].Food Research and Development,2021,42(11):72-76.

加工编辑:张璐

收稿日期:2021-03-06